Prejsť na obsah
Tkanivo
Obličky
Choroba
Normálny obličkový epitel
Synonymá
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumenty

MDCK-II

Cell line · Číslo výrobku 305233

€750.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky Madin-Darbyho psej obličky typu II (MDCK-II) sú epitelovou bunkovou líniou odvodenou z obličiek dospelých samíc kokršpaniela. Tieto bunky sa široko používajú v biomedicínskom výskume vďaka ich jedinečnej schopnosti vytvárať tesné spojenia a polarizované monovrstvy, ktoré sú charakteristickými znakmi epitelových tkanív. Bunky MDCK-II vykazujú robustné rastové a diferenciačné vlastnosti, čo z nich robí vynikajúci model na štúdium biológie epitelových buniek vrátane bunkovej polarity, transportných procesov a bariérovej funkcie

Bunková línia MDCK-II je obzvlášť cenná na skúmanie mechanizmov interakcií medzi vírusom a hostiteľom, najmä na výskum vírusu chrípky. Schopnosť buniek vytvárať polarizované monovrstvy ich robí ideálnymi na štúdium smeru uvoľňovania a šírenia vírusov. Okrem toho sa bunky MDCK-II často využívajú pri štúdiách transportu a toxicity liečiv, pretože ich dobre definované tesné spojenia poskytujú spoľahlivý model na hodnotenie priepustnosti a bariérovej funkcie epitelových buniek. Ich schopnosť reagovať na rôzne rastové faktory a hormóny ďalej zvyšuje ich využiteľnosť v rôznych výskumných aplikáciách

Vzhľadom na ich pôvod v obličkovom tkanive výskumníci používajú bunky MDCK-II aj na skúmanie fyziológie a patofyziológie obličiek. Táto bunková línia umožňuje nahliadnuť do funkcie epitelových buniek obličiek vrátane prenosu iónov, regulácie tekutín a reakcií buniek na poškodenie. Celkovo sú bunky MDCK-II univerzálnym a nevyhnutným nástrojom pri štúdiu biológie epitelových buniek a súvisiacich biomedicínskych oblastí

Tkanivo
Obličky
Choroba
Normálny obličkový epitel
Aplikácie
Virológia; štúdie epiteliálneho transportu; výskum tesných spojení; testy priepustnosti liekov; bunková biológia
Synonymá
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klasifikácia

Organizmus
Pes
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; wildtype cell line
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové
Doba zdvojnásobenia
cca 16–20 hodín

04Identifikátory

Citácia
MDCK-II (katalógové číslo Cytion 305233)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 5
Hustota výsevu
2 až 5 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
Kokeršpaniel
Vek darcu
Dospelí