- الأنسجة
- الكلى
- المرض
- الظهارة الكلوية الطبيعية
- المرادفات
- MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT
المستندات
MDCK-II
Cell line · رقم المنتج 305233
التخصيص / التوصيات
- MDCK-IICell line€750.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
خلايا كلى مادن-داربي كانين من النوع الثاني (MDCK-II) هي خط خلايا طلائية مشتقة من كلية أنثى كلب ذليل بالغ. تُستخدم هذه الخلايا على نطاق واسع في الأبحاث الطبية الحيوية نظرًا لقدرتها الفريدة على تشكيل وصلات محكمة وطبقات أحادية مستقطبة، وهي سمات مميزة للأنسجة الظهارية. تُظهر خلايا MDCK-II خصائص نمو وتمايز قوية، مما يجعلها نموذجًا ممتازًا لدراسة بيولوجيا الخلايا الظهارية، بما في ذلك قطبية الخلية وعمليات النقل ووظيفة الحاجز
ويُعد خط خلايا MDCK-II ذا قيمة خاصة لدراسة آليات التفاعلات بين الفيروس والمضيف، خاصةً في أبحاث فيروس الإنفلونزا. وقدرة الخلايا على تكوين طبقات أحادية مستقطبة تجعلها مثالية لدراسة إطلاق الفيروسات وانتشارها في اتجاه معين. بالإضافة إلى ذلك، تُستخدم خلايا MDCK-II بشكل متكرر في دراسات نقل الأدوية والسمية، حيث توفر وصلاتها الضيقة المحددة جيدًا نموذجًا موثوقًا لتقييم نفاذية الخلايا الظهارية ووظيفة الحاجز الواقي. كما تعزز استجابتها لعوامل النمو والهرمونات المختلفة من فائدتها في التطبيقات البحثية المتنوعة
كما يستخدم الباحثون أيضاً خلايا MDCK-II لاستكشاف فسيولوجيا الكلى والفيزيولوجيا المرضية نظراً لأصلها من أنسجة الكلى. يوفر هذا الخط الخلوي رؤى حول وظيفة الخلايا الظهارية الكلوية، بما في ذلك نقل الأيونات وتنظيم السوائل والاستجابات الخلوية للإصابة. وبشكل عام، تُعد خلايا MDCK-II أداة متعددة الاستخدامات وأساسية في دراسة بيولوجيا الخلايا الظهارية والمجالات الطبية الحيوية ذات الصلة
- الأنسجة
- الكلى
- المرض
- الظهارة الكلوية الطبيعية
- التطبيقات
- علم الفيروسات؛ دراسات النقل الظهاري؛ أبحاث الوصلات الضيقة؛ اختبارات نفاذية الأدوية؛ بيولوجيا الخلية
- المرادفات
- MDCK II
- MDCKII
- MDCK2
- MDCK-2
- MDCK Type II
- MDCKII-WT
02التصنيف
- كائن حي
- كلب
- الجنس
- أنثى
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- No genetic modification; wildtype cell line
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- شبيه بالظهارة
- نوع الخلية
- الظهارة
- زمن المضاعفة
- حوالي 16-20 ساعة
04المعرّفات
- المرجع
- MDCK-II (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305233)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9615
- سيلوصور
- CVCL_0424
05التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- نسبة التقسيم
- من 1 إلى 5
- كثافة البذر
- 2 إلى 5 × 104 خلية/سم2
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
07المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- كلب ذليل الديك الرومي
- عمر المتبرع
- للبالغين
08الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم