Tartalomra ugrás
Szövet
Vese
Betegség
Normális vesehám
Szinonimák
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumentumok

MDCK-II

Cell line · Termékszám 305233

€750.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Madin-Darby Canine Kidney II. típusú (MDCK-II) sejtek egy felnőtt nőstény cocker spániel veséjéből származó epitélsejtvonal. Ezeket a sejteket széles körben használják az orvosbiológiai kutatásokban, mivel egyedülálló módon képesek szoros kötéseket és polarizált monorétegeket képezni, amelyek a hámszövetek jellegzetes tulajdonságai. Az MDCK-II sejtek robusztus növekedési és differenciálódási tulajdonságokkal rendelkeznek, így kiváló modellként szolgálnak a hámsejtek biológiájának tanulmányozására, beleértve a sejtpolaritást, a transzportfolyamatokat és a barrierfunkciót

Az MDCK-II sejtvonal különösen értékes a vírus-gazda kölcsönhatások mechanizmusainak vizsgálatára, különösen az influenzavírus kutatásában. A sejtek polarizált monorétegek kialakítására való képessége miatt ideálisak a vírusok irányított felszabadulásának és terjedésének tanulmányozására. Ezenkívül az MDCK-II sejteket gyakran alkalmazzák a gyógyszer-transzport és toxicitás vizsgálataiban, mivel jól definiált szoros kötődéseik megbízható modellt biztosítanak a hámsejtek permeabilitásának és barrierfunkciójának értékeléséhez. A különböző növekedési faktorokra és hormonokra való érzékenységük tovább növeli hasznosságukat a különböző kutatási alkalmazásokban

A kutatók az MDCK-II sejteket a vese fiziológiájának és patofiziológiájának vizsgálatára is használják, mivel veseszövetből származnak. Ez a sejtvonal betekintést nyújt a vesehámsejtek működésébe, beleértve az iontranszportot, a folyadékszabályozást és a sérülésekre adott sejtválaszokat. Összességében az MDCK-II sejtek sokoldalú és nélkülözhetetlen eszközt jelentenek az epithelsejtek biológiájának és a kapcsolódó biomedicinális területeknek a tanulmányozásában

Szövet
Vese
Betegség
Normális vesehám
Alkalmazások
Virológia; hámsejtek transzportjának vizsgálata; szoros kapcsolódási pontok kutatása; gyógyszeráteresztő képességi vizsgálatok; sejtbiológia
Szinonimák
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Osztályozás

Organizmus
Kutya
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype cell line
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithelialis
Kettőzési idő
kb. 16–20 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
MDCK-II (Cytion katalógusszám 305233)
NCBI adóazonosító szám
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
2–5 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
Cocker spániel
Az adományozó életkora
Felnőtt