MDCK-II

As células Madin-Darby Canine Kidney tipo II (MDCK-II) são uma linhagem celular epitelial derivada do rim de uma fêmea adulta da raça cocker spaniel. Essas células são amplamente utilizadas na pesquisa biomédica devido à sua capacidade única de formar junções apertadas e monocamadas polarizadas, características típicas dos tecidos epiteliais. As células MDCK-II apresentam propriedades robustas de crescimento e diferenciação, tornando-as um excelente modelo para o estudo da biologia das células epiteliais, incluindo polaridade celular, processos de transporte e função de barreira.

A linhagem celular MDCK-II é particularmente valiosa para investigar os mecanismos das interações vírus-hospedeiro, especialmente na pesquisa do vírus da gripe. A capacidade das células de formar monocamadas polarizadas as torna ideais para o estudo da liberação direcional e da disseminação de vírus. Além disso, as células MDCK-II são frequentemente utilizadas em estudos de transporte de fármacos e toxicidade, já que suas junções estreitas bem definidas fornecem um modelo confiável para avaliar a permeabilidade e a função de barreira das células epiteliais. Sua capacidade de resposta a vários fatores de crescimento e hormônios aumenta ainda mais sua utilidade em diversas aplicações de pesquisa.

Os pesquisadores também utilizam as células MDCK-II para explorar a fisiologia e a fisiopatologia renal, dada sua origem no tecido renal. Essa linhagem celular fornece insights sobre a função das células epiteliais renais, incluindo o transporte de íons, a regulação de fluidos e as respostas celulares a lesões. De modo geral, as células MDCK-II são uma ferramenta versátil e essencial no estudo da biologia das células epiteliais e em áreas biomédicas relacionadas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.