Pāriet uz saturu
Audums
Nieres
Slimība
Normāls nieru epitēlijs
Sinonīmi
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumenti

MDCK-II

Cell line · Preces numurs 305233

€750.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Madin-Darby Canine Kidney II tipa (MDCK-II) šūnas ir epitēlija šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušu kokerspanieļu mātītes nierēm. Šīs šūnas plaši izmanto biomedicīniskajos pētījumos, jo tām piemīt unikāla spēja veidot hermētiskus savienojumus un polarizētus monoslāņus, kas ir raksturīgas epitēlija audiem. MDCK-II šūnām piemīt stabilas augšanas un diferenciācijas īpašības, padarot tās par lielisku modeli epitēlija šūnu bioloģijas, tostarp šūnu polaritātes, transporta procesu un barjeras funkciju, izpētei

MDCK-II šūnu līnija ir īpaši vērtīga, lai pētītu vīrusa un saimnieka mijiedarbības mehānismus, jo īpaši gripas vīrusu pētījumos. Šūnu spēja veidot polarizētus monoslāņus padara tās ideāli piemērotas vīrusu virzītas atbrīvošanās un izplatīšanās izpētei. Turklāt MDCK-II šūnas bieži izmanto zāļu transportēšanas un toksicitātes pētījumos, jo to labi definētie hermētiskie savienojumi ir uzticams modelis epitēlija šūnu caurlaidības un barjeras funkcijas novērtēšanai. To spēja reaģēt uz dažādiem augšanas faktoriem un hormoniem vēl vairāk palielina to lietderību dažādos pētījumos

Pētnieki izmanto MDCK-II šūnas arī nieru fizioloģijas un patofizioloģijas izpētei, ņemot vērā to izcelsmi no nieru audiem. Šī šūnu līnija sniedz ieskatu par nieru epitēlija šūnu funkcijām, tostarp jonu transportu, šķidruma regulāciju un šūnu reakciju uz bojājumiem. Kopumā MDCK-II šūnas ir daudzpusīgs un būtisks instruments epitēlija šūnu bioloģijas un saistīto biomedicīnas jomu pētniecībā

Audums
Nieres
Slimība
Normāls nieru epitēlijs
Pieteikumi
Viroloģija; epitēlija transporta pētījumi; ciešo savienojumu izpēte; zāļu caurlaidības analīzes; šūnu bioloģija
Sinonīmi
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klasifikācija

Organisms
Suns
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; wildtype cell line
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 16–20 stundas

04Identifikatori

Atsauce
MDCK-II (Cytion kataloga numurs 305233)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Kokerspaniels
Donora vecums
Pieaugušo