Langsung ke isi
Tisu
Ginjal
Penyakit
Epitel ginjal normal
Sinonim
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumen

MDCK-II

Cell line · Nomor produk 305233

€750.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Sel Madin-Darby Canine Kidney tipe II (MDCK-II) adalah garis sel epitel yang berasal dari ginjal anjing jantan cocker spaniel betina dewasa. Sel-sel ini banyak digunakan dalam penelitian biomedis karena kemampuannya yang unik untuk membentuk persimpangan yang rapat dan lapisan tunggal yang terpolarisasi, yang merupakan ciri khas jaringan epitel. Sel MDCK-II menunjukkan sifat pertumbuhan dan diferensiasi yang kuat, menjadikannya model yang sangat baik untuk mempelajari biologi sel epitel, termasuk polaritas sel, proses transpor, dan fungsi penghalang

Garis sel MDCK-II sangat berharga untuk menyelidiki mekanisme interaksi virus-inang, terutama untuk penelitian virus influenza. Kemampuan sel untuk membentuk monolayer terpolarisasi membuatnya ideal untuk mempelajari pelepasan dan penyebaran virus secara terarah. Selain itu, sel MDCK-II sering digunakan dalam transportasi obat dan studi toksisitas, karena persimpangan ketatnya yang terdefinisi dengan baik memberikan model yang dapat diandalkan untuk menilai permeabilitas dan fungsi penghalang sel epitel. Daya tanggapnya terhadap berbagai faktor pertumbuhan dan hormon semakin meningkatkan kegunaannya dalam berbagai aplikasi penelitian

Para peneliti juga menggunakan sel MDCK-II untuk mengeksplorasi fisiologi dan patofisiologi ginjal, mengingat asalnya dari jaringan ginjal. Garis sel ini memberikan wawasan tentang fungsi sel epitel ginjal, termasuk transportasi ion, regulasi cairan, dan respons seluler terhadap cedera. Secara keseluruhan, sel MDCK-II adalah alat serbaguna dan penting dalam studi biologi sel epitel dan bidang biomedis terkait

Tisu
Ginjal
Penyakit
Epitel ginjal normal
Aplikasi
Virologi; studi transportasi epitel; penelitian sambungan rapat; uji permeabilitas obat; biologi sel
Sinonim
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klasifikasi

Organisme
Anjing
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
Bebas Transgenik
Rincian status GMO
No genetic modification; wildtype cell line
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Epitel
Waktu penggandaan
sekitar 16–20 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
MDCK-II (nomor katalog Cytion 305233)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Rasio pemisahan
1 sampai 5
Kepadatan penanaman
2 hingga 5 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Jenis / subspesies
Cocker Spaniel
Usia donor
Dewasa