Siirry sisältöön
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Normaali munuaisepiteeli
Synonyymit
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Asiakirjat

MDCK-II

Cell line · Tuotenumero 305233

€750.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) -solut ovat epiteelisolulinja, joka on peräisin aikuisen naaraspuolisen cockerspanielin munuaisesta. Näitä soluja käytetään laajalti biolääketieteellisessä tutkimuksessa, koska ne pystyvät ainutlaatuisella tavalla muodostamaan tiukkoja liitoksia ja polarisoituneita monokerroksia, jotka ovat epiteelikudoksille ominaisia piirteitä. MDCK-II-soluilla on vahvat kasvu- ja erilaistumisominaisuudet, minkä vuoksi ne ovat erinomainen malli epiteelisolujen biologian tutkimiseen, mukaan lukien solujen polariteetti, kuljetusprosessit ja esteen toiminta

MDCK-II-solulinja on erityisen arvokas viruksen ja isännän vuorovaikutusmekanismien tutkimisessa, erityisesti influenssavirustutkimuksessa. Solujen kyky muodostaa polarisoituneita monokerroksia tekee niistä ihanteellisia virusten suuntautuneen vapautumisen ja leviämisen tutkimiseen. Lisäksi MDCK-II-soluja käytetään usein lääkekuljetus- ja toksisuustutkimuksissa, koska niiden hyvin määritellyt tiiviit liitokset tarjoavat luotettavan mallin epiteelisolujen läpäisevyyden ja esteen toiminnan arvioimiseksi. Niiden herkkyys reagoida erilaisiin kasvutekijöihin ja hormoneihin lisää entisestään niiden käyttökelpoisuutta erilaisissa tutkimussovelluksissa

Tutkijat käyttävät MDCK-II-soluja myös munuaisten fysiologian ja patofysiologian tutkimiseen, koska ne ovat peräisin munuaiskudoksesta. Tämä solulinja tarjoaa tietoa munuaisten epiteelisolujen toiminnasta, mukaan lukien ionien kuljetus, nesteen säätely ja solujen reaktiot vammoihin. Kaiken kaikkiaan MDCK-II-solut ovat monipuolinen ja tärkeä väline epiteelisolujen biologian ja siihen liittyvien biolääketieteen alojen tutkimuksessa

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Normaali munuaisepiteeli
Sovellukset
Virologia; epiteelisolujen kuljetusmekanismien tutkimus; tiiviiden liitoskohtien tutkimus; lääkeaineiden läpäisevyystutkimukset; solubiologia
Synonyymit
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Luokittelu

Organismi
Koira
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype cell line
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
noin 16–20 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
MDCK-II (Cytionin luettelonumero 305233)
NCBI-verotunnus
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
2–5 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Cockerspanieli
Luovuttajan ikä
Aikuiset