- Tkivo
- Ledvice
- Bolezen
- Normalni ledvični epitel
- Sinonimi
- MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT
Dokumenti
MDCK-II
Cell line · Številka izdelka 305233
Prilagajanje / Priporočila
- MDCK-IICell line€750.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celice Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) so epitelijska celična linija, pridobljena iz ledvic odrasle samice kokeršpanjela. Te celice se pogosto uporabljajo v biomedicinskih raziskavah zaradi svoje edinstvene sposobnosti oblikovanja tesnih stikov in polariziranih monoslojev, ki so značilne za epitelijska tkiva. Celice MDCK-II imajo robustne lastnosti rasti in diferenciacije, zato so odličen model za preučevanje biologije epitelijskih celic, vključno s polarnostjo celic, transportnimi procesi in funkcijo pregrad
Celična linija MDCK-II je še posebej dragocena za raziskovanje mehanizmov interakcij med virusom in gostiteljem, zlasti za raziskave virusov gripe. Ker so celice sposobne tvoriti polarizirane monosloje, so idealne za preučevanje usmerjenega sproščanja in širjenja virusov. Poleg tega se celice MDCK-II pogosto uporabljajo v študijah prenosa in toksičnosti zdravil, saj njihove dobro definirane tesne povezave zagotavljajo zanesljiv model za ocenjevanje prepustnosti in zaporne funkcije epitelijskih celic. Njihova odzivnost na različne rastne dejavnike in hormone še povečuje njihovo uporabnost v različnih raziskavah
Raziskovalci celice MDCK-II uporabljajo tudi za raziskovanje fiziologije in patofiziologije ledvic, saj izvirajo iz ledvičnega tkiva. Ta celična linija omogoča vpogled v delovanje ledvičnih epitelnih celic, vključno s prenosom ionov, uravnavanjem tekočin in celičnimi odzivi na poškodbe. Na splošno so celice MDCK-II vsestransko in bistveno orodje pri preučevanju biologije epitelijskih celic in sorodnih biomedicinskih področij
- Tkivo
- Ledvice
- Bolezen
- Normalni ledvični epitel
- Uporaba
- Virologija; raziskave epitelijskega transporta; raziskave tesnih spojev; preskusi prepustnosti zdravil; celična biologija
- Sinonimi
- MDCK II
- MDCKII
- MDCK2
- MDCK-2
- MDCK Type II
- MDCKII-WT
02Razvrstitev
- Organizem
- Pes
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- Brez gensko spremenjenih organizmov
- Podrobnosti o statusu GSO
- No genetic modification; wildtype cell line
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Vrsta celice
- Epitelijski
- Čas podvojitve
- približno 16–20 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- MDCK-II (kataloška številka Cytion 305233)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_0424
05Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Razmerje delitve
- 1 do 5
- Gostota setve
- 2 do 5 x 104 celic/cm2
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
07Donator
- Pasma / podvrsta
- Kokeršpanjel
- Starost darovalca
- Odrasli
08Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da