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Gewebe
Niere
Krankheit
Normales Nierenepithel
Synonyme
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

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MDCK-II

Cell line · Artikelnummer 305233

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Madin-Darby Canine Kidney Typ II (MDCK-II)-Zellen sind eine Epithelzelllinie, die aus der Niere eines erwachsenen weiblichen Cockerspaniels stammt. Diese Zellen werden in der biomedizinischen Forschung häufig verwendet, da sie die einzigartige Fähigkeit besitzen, enge Verbindungen und polarisierte Monolayer zu bilden, die charakteristisch für Epithelgewebe sind. MDCK-II-Zellen weisen robuste Wachstums- und Differenzierungseigenschaften auf, was sie zu einem ausgezeichneten Modell für die Untersuchung der Biologie von Epithelzellen macht, einschließlich Zellpolarität, Transportprozesse und Barrierefunktion

Die MDCK-II-Zelllinie ist besonders wertvoll für die Untersuchung der Mechanismen von Virus-Wirt-Interaktionen, insbesondere für die Erforschung des Influenzavirus. Die Fähigkeit der Zellen, polarisierte Monoschichten zu bilden, macht sie ideal für die Untersuchung der gerichteten Freisetzung und Verbreitung von Viren. Darüber hinaus werden MDCK-II-Zellen häufig in Studien zum Arzneimitteltransport und zur Toxizität eingesetzt, da ihre gut definierten tight junctions ein zuverlässiges Modell für die Beurteilung der Permeabilität und Barrierefunktion von Epithelzellen darstellen. Ihre Reaktionsfähigkeit auf verschiedene Wachstumsfaktoren und Hormone erhöht ihren Nutzen für verschiedene Forschungsanwendungen noch weiter

Da die MDCK-II-Zellen aus Nierengewebe stammen, verwenden Forscher sie auch zur Erforschung der Physiologie und Pathophysiologie der Niere. Diese Zelllinie bietet Einblicke in die Funktion von Nierenepithelzellen, einschließlich des Ionentransports, der Flüssigkeitsregulation und der zellulären Reaktionen auf Verletzungen. Insgesamt sind MDCK-II-Zellen ein vielseitiges und unverzichtbares Instrument für die Erforschung der Epithelzellbiologie und verwandter biomedizinischer Bereiche

Gewebe
Niere
Krankheit
Normales Nierenepithel
Anwendungen
Virologie; Untersuchungen zum Epitheltransport; Forschung zu Tight Junctions; Untersuchungen zur Wirkstoffpermeabilität; Zellbiologie
Synonyme
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klassifizierung

Organismus
Hund
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
Ohne Gentechnik
Angaben zum GVO-Status
No genetic modification; wildtype cell line
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelial
Verdopplungszeit
ca. 16–20 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
MDCK-II (Cytion Katalognummer 305233)
NCBI-Steuer-ID
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
2 bis 5 x 104 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
Cocker Spaniel
Alter des Spenders
Erwachsener