Skip to content
Tissue
Thận
Disease
Biểu mô thận bình thường
Synonyms
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Documents

MDCK-II

Cell line · Product number 305233

€750.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) là một dòng tế bào biểu mô được phân lập từ thận của một con chó cái giống Cocker Spaniel trưởng thành. Các tế bào này được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu y sinh học nhờ khả năng đặc biệt của chúng trong việc hình thành các liên kết chặt chẽ và lớp đơn phân cực, đây là những đặc điểm đặc trưng của mô biểu mô. Tế bào MDCK-II thể hiện khả năng phát triển và biệt hóa mạnh mẽ, khiến chúng trở thành mô hình lý tưởng để nghiên cứu sinh học tế bào biểu mô, bao gồm tính phân cực của tế bào, quá trình vận chuyển và chức năng hàng rào

Dòng tế bào MDCK-II đặc biệt có giá trị trong việc nghiên cứu cơ chế tương tác giữa virus và vật chủ, đặc biệt là trong nghiên cứu virus cúm. Khả năng hình thành lớp đơn phân cực của các tế bào này khiến chúng trở thành mô hình lý tưởng để nghiên cứu sự giải phóng và lan truyền có hướng của virus. Ngoài ra, tế bào MDCK-II thường được sử dụng trong các nghiên cứu vận chuyển thuốc và độc tính, vì các liên kết chặt chẽ được định nghĩa rõ ràng của chúng cung cấp một mô hình đáng tin cậy để đánh giá độ thấm và chức năng hàng rào của tế bào biểu mô. Khả năng phản ứng của chúng với các yếu tố tăng trưởng và hormone khác nhau càng tăng cường tính ứng dụng của chúng trong các nghiên cứu đa dạng

Các nhà nghiên cứu cũng sử dụng tế bào MDCK-II để khám phá sinh lý và bệnh lý thận, do nguồn gốc của chúng từ mô thận. Dòng tế bào này cung cấp thông tin về chức năng của tế bào biểu mô thận, bao gồm vận chuyển ion, điều hòa dịch thể và phản ứng tế bào với tổn thương. Tổng thể, tế bào MDCK-II là công cụ đa năng và thiết yếu trong nghiên cứu sinh học tế bào biểu mô và các lĩnh vực y sinh học liên quan

Tissue
Thận
Disease
Biểu mô thận bình thường
Applications
Vi-rút học; nghiên cứu vận chuyển biểu mô; nghiên cứu về các mối nối chặt chẽ; thử nghiệm độ thấm của thuốc; sinh học tế bào
Synonyms
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Thượng bì
Doubling time
khoảng 16–20 giờ

04Identifiers

Citation
MDCK-II (Số catalog Cytion 305233)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
2 đến 5 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Breed / subspecies
Chó Cocker Spaniel
Donor age
Người lớn