Mine otse sisu juurde
Kude
Neerud
Haigus
Normaalne neeru epiteel
Sünonüümid
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumendid

MDCK-II

Cell line · Toote number 305233

€750.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Madin-Darby Canine Kidney tüüp II (MDCK-II) rakud on epiteelirakuliin, mis on saadud täiskasvanud emase cocker spanieli neerudest. Neid rakke kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes uuringutes tänu nende ainulaadsele võimele moodustada tihedaid ühendusi ja polariseeritud monokihti, mis on epiteelikudedele iseloomulikud tunnused. MDCK-II rakkudel on tugevad kasvu- ja diferentseerumisomadused, mis teeb neist suurepärase mudeli epiteelirakkude bioloogia, sealhulgas rakupolaarsuse, transpordiprotsesside ja barjäärifunktsiooni uurimiseks

MDCK-II rakuliin on eriti väärtuslik viiruse ja peremehe vastastikmõju mehhanismide uurimiseks, eriti gripiviiruse uurimisel. Rakkude võime moodustada polariseeritud monokihti muudab nad ideaalseks viiruste suunalise vabanemise ja leviku uurimiseks. Lisaks kasutatakse MDCK-II rakke sageli ravimite transpordi ja toksilisuse uuringutes, kuna nende hästi määratletud tihedad ühendused pakuvad usaldusväärset mudelit epiteelirakkude läbilaskvuse ja barjäärifunktsiooni hindamiseks. Nende reageerimisvõime erinevatele kasvufaktoritele ja hormoonidele suurendab veelgi nende kasulikkust mitmesugustes teadusuuringutes

Teadlased kasutavad MDCK-II rakke ka neerufüsioloogia ja patofüsioloogia uurimiseks, arvestades nende päritolu neerukoes. See rakuliin annab ülevaate neeru epiteelirakkude funktsioonist, sealhulgas ioonitranspordist, vedeliku regulatsioonist ja rakkude reaktsioonist vigastustele. Üldiselt on MDCK-II rakud mitmekülgne ja oluline vahend epiteelirakkude bioloogia ja sellega seotud biomeditsiiniliste valdkondade uurimisel

Kude
Neerud
Haigus
Normaalne neeru epiteel
Rakendused
Viroloogia; epiteeli transporti käsitlevad uuringud; tihedate liideste uurimine; ravimite läbilaskvuse määramised; rakubioloogia
Sünonüümid
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klassifikatsioon

Organism
Koer
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype cell line
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteel
Kahekordistumisaeg
u. 16–20 tundi

04Tunnused

Viide
MDCK-II (Cytioni katalooginumber 305233)
NCBI maksukood
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
2 kuni 5 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Cocker-spanjel
Doonori vanus
Täiskasvanud