- Kude
- Neerud
- Haigus
- Normaalne neeru epiteel
- Sünonüümid
- MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT
Dokumendid
MDCK-II
Cell line · Toote number 305233
Kohandamine / Soovitused
- MDCK-IICell line€750.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
Madin-Darby Canine Kidney tüüp II (MDCK-II) rakud on epiteelirakuliin, mis on saadud täiskasvanud emase cocker spanieli neerudest. Neid rakke kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes uuringutes tänu nende ainulaadsele võimele moodustada tihedaid ühendusi ja polariseeritud monokihti, mis on epiteelikudedele iseloomulikud tunnused. MDCK-II rakkudel on tugevad kasvu- ja diferentseerumisomadused, mis teeb neist suurepärase mudeli epiteelirakkude bioloogia, sealhulgas rakupolaarsuse, transpordiprotsesside ja barjäärifunktsiooni uurimiseks
MDCK-II rakuliin on eriti väärtuslik viiruse ja peremehe vastastikmõju mehhanismide uurimiseks, eriti gripiviiruse uurimisel. Rakkude võime moodustada polariseeritud monokihti muudab nad ideaalseks viiruste suunalise vabanemise ja leviku uurimiseks. Lisaks kasutatakse MDCK-II rakke sageli ravimite transpordi ja toksilisuse uuringutes, kuna nende hästi määratletud tihedad ühendused pakuvad usaldusväärset mudelit epiteelirakkude läbilaskvuse ja barjäärifunktsiooni hindamiseks. Nende reageerimisvõime erinevatele kasvufaktoritele ja hormoonidele suurendab veelgi nende kasulikkust mitmesugustes teadusuuringutes
Teadlased kasutavad MDCK-II rakke ka neerufüsioloogia ja patofüsioloogia uurimiseks, arvestades nende päritolu neerukoes. See rakuliin annab ülevaate neeru epiteelirakkude funktsioonist, sealhulgas ioonitranspordist, vedeliku regulatsioonist ja rakkude reaktsioonist vigastustele. Üldiselt on MDCK-II rakud mitmekülgne ja oluline vahend epiteelirakkude bioloogia ja sellega seotud biomeditsiiniliste valdkondade uurimisel
- Kude
- Neerud
- Haigus
- Normaalne neeru epiteel
- Rakendused
- Viroloogia; epiteeli transporti käsitlevad uuringud; tihedate liideste uurimine; ravimite läbilaskvuse määramised; rakubioloogia
- Sünonüümid
- MDCK II
- MDCKII
- MDCK2
- MDCK-2
- MDCK Type II
- MDCKII-WT
02Klassifikatsioon
- Organism
- Koer
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-vaba
- GMO-staatuse üksikasjad
- No genetic modification; wildtype cell line
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Epiteel
- Kahekordistumisaeg
- u. 16–20 tundi
04Tunnused
- Viide
- MDCK-II (Cytioni katalooginumber 305233)
- NCBI maksukood
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_0424
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Jagamissuhe
- 1–5
- Külvitihedus
- 2 kuni 5 x 104 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Tõug / alamliik
- Cocker-spanjel
- Doonori vanus
- Täiskasvanud
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah