Gå direkt till innehållet
Vävnad
Njurar
Sjukdom
Normalt njurepitel
Synonymer
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

MDCK-II

Cell line · Produktnummer 305233

€750.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II)-celler är en epitelcellinje som härrör från njuren hos en vuxen cocker spaniel-hona. Dessa celler används ofta inom biomedicinsk forskning på grund av sin unika förmåga att bilda tight junctions och polariserade monolager, vilket är karakteristiska drag för epitelvävnader. MDCK-II-celler uppvisar robusta tillväxt- och differentieringsegenskaper, vilket gör dem till en utmärkt modell för att studera epitelcellers biologi, inklusive cellpolaritet, transportprocesser och barriärfunktion

MDCK-II-cellinjen är särskilt värdefull för att undersöka mekanismerna för interaktioner mellan virus och värd, i synnerhet för forskning om influensavirus. Cellernas förmåga att bilda polariserade monolager gör dem idealiska för att studera den riktade frisättningen och spridningen av virus. Dessutom används MDCK-II-celler ofta i studier av läkemedelstransport och toxicitet, eftersom deras väldefinierade tight junctions utgör en tillförlitlig modell för att bedöma epitelcellernas permeabilitet och barriärfunktion. Deras känslighet för olika tillväxtfaktorer och hormoner ökar ytterligare deras användbarhet i olika forskningsapplikationer

Forskare använder också MDCK-II-celler för att utforska njurfysiologi och patofysiologi, eftersom de härstammar från njurvävnad. Denna cellinje ger insikter i njurepitelcellernas funktion, inklusive jontransport, vätskereglering och cellulära svar på skador. Sammantaget är MDCK-II-celler ett mångsidigt och viktigt verktyg för studier av epitelcellsbiologi och relaterade biomedicinska områden

Vävnad
Njurar
Sjukdom
Normalt njurepitel
Ansökningar
Virologi; studier av epitelial transport; forskning om täta förbindelser; analyser av läkemedelspermeabilitet; cellbiologi
Synonymer
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klassificering

Organism
Hund
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype cell line
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epitelial
Fördubblingstid
ca 16–20 timmar

04Identifierare

Källa
MDCK-II (Cytion katalognummer 305233)
NCBI-skattenummer
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
2 till 5 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
Cocker Spaniel
Donatorns ålder
Vuxen