- Tissue
- Rein
- Disease
- Épithélium rénal normal
- Synonyms
- MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT
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MDCK-II
Cell line · Product number 305233
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01General information
- Description
Les cellules Madin-Darby Canine Kidney de type II (MDCK-II) constituent une lignée cellulaire épithéliale dérivée du rein d’une femelle cocker spaniel adulte. Ces cellules sont largement utilisées dans la recherche biomédicale en raison de leur capacité unique à former des jonctions serrées et des monocouches polarisées, qui sont des caractéristiques propres aux tissus épithéliaux. Les cellules MDCK-II présentent de solides propriétés de croissance et de différenciation, ce qui en fait un excellent modèle pour l’étude de la biologie des cellules épithéliales, notamment la polarité cellulaire, les processus de transport et la fonction de barrière.
La lignée cellulaire MDCK-II est particulièrement précieuse pour l’étude des mécanismes d’interaction entre les virus et leur hôte, notamment dans le cadre de la recherche sur le virus de la grippe. La capacité de ces cellules à former des monocouches polarisées en fait un modèle idéal pour étudier la libération et la propagation directionnelles des virus. De plus, les cellules MDCK-II sont fréquemment utilisées dans les études sur le transport des médicaments et la toxicité, car leurs jonctions serrées bien définies constituent un modèle fiable pour évaluer la perméabilité et la fonction de barrière des cellules épithéliales. Leur réactivité à divers facteurs de croissance et hormones renforce encore leur utilité dans de nombreuses applications de recherche.
Les chercheurs utilisent également les cellules MDCK-II pour explorer la physiologie et la physiopathologie rénales, compte tenu de leur origine tissulaire rénale. Cette lignée cellulaire permet de mieux comprendre le fonctionnement des cellules épithéliales rénales, notamment le transport ionique, la régulation des fluides et les réponses cellulaires aux lésions. Dans l’ensemble, les cellules MDCK-II constituent un outil polyvalent et essentiel dans l’étude de la biologie des cellules épithéliales et des domaines biomédicaux connexes.
- Tissue
- Rein
- Disease
- Épithélium rénal normal
- Applications
- Virologie; études sur le transport épithélial; recherche sur les jonctions serrées; tests de perméabilité aux médicaments; biologie cellulaire
- Synonyms
- MDCK II
- MDCKII
- MDCK2
- MDCK-2
- MDCK Type II
- MDCKII-WT
02Classification
- Organism
- Dog
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype cell line
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Cell type
- Épithélial
- Doubling time
- environ 16 à 20 heures
04Identifiers
- Citation
- MDCK-II (numéro de catalogue Cytion 305233)
- NCBI TaxID
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_0424
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Split ratio
- 1 à 5
- Seeding density
- de 2 à 5 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Breed / subspecies
- Cocker spaniel
- Donor age
- Adulte
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes