Gå direkte til indholdet
Væv
Nyre
Sygdom
Normalt nyreepitel
Synonymer
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumenter

MDCK-II

Cell line · Varenummer 305233

€750.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II)-celler er en epitelcellelinje, der stammer fra nyrerne fra en voksen huncockerspaniel. Disse celler bruges i vid udstrækning i biomedicinsk forskning på grund af deres unikke evne til at danne tight junctions og polariserede monolag, som er karakteristiske træk ved epitelvæv. MDCK-II-celler udviser robuste vækst- og differentieringsegenskaber, hvilket gør dem til en fremragende model til undersøgelse af epitelcellebiologi, herunder cellepolaritet, transportprocesser og barrierefunktion

MDCK-II-cellelinjen er særlig værdifuld til at undersøge mekanismerne i virus-vært-interaktioner, især til forskning i influenzavirus. Cellernes evne til at danne polariserede monolag gør dem ideelle til at studere den retningsbestemte frigivelse og spredning af virus. Derudover anvendes MDCK-II-celler ofte i undersøgelser af lægemiddeltransport og toksicitet, da deres veldefinerede tight junctions giver en pålidelig model til vurdering af epitelcellers permeabilitet og barrierefunktion. Deres følsomhed over for forskellige vækstfaktorer og hormoner øger yderligere deres anvendelighed i forskellige forskningsapplikationer

Forskere bruger også MDCK-II-celler til at udforske nyrernes fysiologi og patofysiologi, da de stammer fra nyrevæv. Denne cellelinje giver indsigt i nyrernes epitelcellefunktion, herunder iontransport, væskeregulering og cellulære reaktioner på skader. Samlet set er MDCK-II-celler et alsidigt og vigtigt værktøj i studiet af epitelcellebiologi og relaterede biomedicinske områder

Væv
Nyre
Sygdom
Normalt nyreepitel
Anvendelser
Virologi; undersøgelser af epitelial transport; forskning i tætte samlinger; analyser af lægemiddelpermeabilitet; cellebiologi
Synonymer
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klassificering

Organisme
Hund
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; wildtype cell line
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelial
Fordoblingstid
ca. 16–20 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MDCK-II (Cytion katalognummer 305233)
NCBI-skattenummer
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
2 til 5 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
Cocker Spaniel
Donorens alder
Voksen