Gå til innholdet
Vev
Nyre
Sykdom
Normalt nyreepitel
Synonymer
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Dokumenter

MDCK-II

Cell line · Produktnummer 305233

€750.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Madin-Darby Canine Kidney type II-celler (MDCK-II) er en epitelcellelinje som stammer fra nyrene til en voksen cocker spaniel-hunn. Disse cellene er mye brukt i biomedisinsk forskning på grunn av deres unike evne til å danne tette forbindelser og polariserte monolag, som er karakteristiske trekk ved epitelvev. MDCK-II-celler har robuste vekst- og differensieringsegenskaper, noe som gjør dem til en utmerket modell for studier av epitelcellebiologi, inkludert cellepolaritet, transportprosesser og barrierefunksjon

MDCK-II-cellelinjen er spesielt verdifull for å undersøke mekanismene i virus-vert-interaksjoner, særlig i forbindelse med forskning på influensavirus. Cellenes evne til å danne polariserte monolag gjør dem ideelle for å studere retningsbestemt frigjøring og spredning av virus. I tillegg brukes MDCK-II-celler ofte i studier av medikamenttransport og toksisitet, ettersom deres veldefinerte tight junctions er en pålitelig modell for å vurdere epitelcellenes permeabilitet og barrierefunksjon. Cellenes respons på ulike vekstfaktorer og hormoner gjør dem enda mer anvendelige i ulike forskningsformål

Forskere bruker også MDCK-II-celler til å utforske nyrenes fysiologi og patofysiologi, siden de stammer fra nyrevev. Denne cellelinjen gir innsikt i nyrenes epitelcellefunksjon, inkludert ionetransport, væskeregulering og cellulære responser på skader. Alt i alt er MDCK-II-celler et allsidig og viktig verktøy i studier av epitelcellebiologi og relaterte biomedisinske felt

Vev
Nyre
Sykdom
Normalt nyreepitel
Søknader
Virologi; studier av epitelial transport; forskning på tette forbindelser; analyser av legemiddelpermeabilitet; cellebiologi
Synonymer
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Klassifisering

Organisme
Hund
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
Uten GMO
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype cell line
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelial
Fordoblingstid
ca. 16–20 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MDCK-II (Cytion katalognummer 305233)
NCBI-skattenummer
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
2 til 5 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
Cocker Spaniel
Donorens alder
Voksen