- Weefsel
- Nieren
- Ziekte
- Normaal niertweevoud
- Synoniemen
- MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT
Documenten
MDCK-II
Cell line · Productnummer 305233
Maatwerk / Aanbevelingen
- MDCK-IICell line€750.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) cellen zijn een epitheliale cellijn afkomstig van de nier van een volwassen vrouwelijke cocker spaniel. Deze cellen worden veel gebruikt in biomedisch onderzoek vanwege hun unieke vermogen om tight junctions en gepolariseerde monolagen te vormen, die karakteristiek zijn voor epitheelweefsels. MDCK-II cellen vertonen robuuste groei- en differentiatie-eigenschappen, waardoor ze een uitstekend model vormen voor het bestuderen van epitheliale celbiologie, waaronder celpolariteit, transportprocessen en barrièrefunctie
De MDCK-II cellijn is bijzonder waardevol voor het onderzoeken van de mechanismen van virus-gastheer interacties, vooral voor onderzoek naar het influenzavirus. Het vermogen van de cellen om gepolariseerde monolagen te vormen maakt ze ideaal voor het bestuderen van de gerichte vrijlating en verspreiding van virussen. Daarnaast worden MDCK-II cellen vaak gebruikt voor onderzoek naar transport en toxiciteit van medicijnen, omdat hun goed gedefinieerde tight junctions een betrouwbaar model vormen voor het beoordelen van de permeabiliteit en barrièrefunctie van epitheelcellen. Hun responsiviteit op verschillende groeifactoren en hormonen vergroot hun bruikbaarheid in diverse onderzoekstoepassingen nog verder
Onderzoekers gebruiken MDCK-II cellen ook om de nierfysiologie en -pathofysiologie te onderzoeken, gezien hun oorsprong in nierweefsel. Deze cellijn biedt inzicht in de epitheliale celfunctie van de nier, waaronder ionentransport, vochtregulatie en cellulaire reacties op letsel. Over het algemeen zijn MDCK-II cellen een veelzijdig en essentieel hulpmiddel bij het bestuderen van epitheelcelbiologie en verwante biomedische gebieden
- Weefsel
- Nieren
- Ziekte
- Normaal niertweevoud
- Toepassingen
- Virologie; onderzoek naar epitheliaal transport; onderzoek naar tight junctions; permeabiliteitstests voor geneesmiddelen; celbiologie
- Synoniemen
- MDCK II
- MDCKII
- MDCK2
- MDCK-2
- MDCK Type II
- MDCKII-WT
02Classificatie
- Organisme
- Hond
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- Zonder genetisch gemodificeerde organismen
- Details over de GGO-status
- No genetic modification; wildtype cell line
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
- Celtype
- Epitheel
- Verdubbelingstijd
- ongeveer 16-20 uur
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- MDCK-II (Cytion catalogusnummer 305233)
- NCBI-belastingnummer
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_0424
05Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 5
- Zaaidichtheid
- 2 tot 5 x 104 cellen/cm2
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
07Donateur
- Soort / ondersoort
- Cocker Spaniël
- Leeftijd van de donor
- Volwassen
08Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja