Ga naar de inhoud
Weefsel
Nieren
Ziekte
Normaal niertweevoud
Synoniemen
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Documenten

MDCK-II

Cell line · Productnummer 305233

€750.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) cellen zijn een epitheliale cellijn afkomstig van de nier van een volwassen vrouwelijke cocker spaniel. Deze cellen worden veel gebruikt in biomedisch onderzoek vanwege hun unieke vermogen om tight junctions en gepolariseerde monolagen te vormen, die karakteristiek zijn voor epitheelweefsels. MDCK-II cellen vertonen robuuste groei- en differentiatie-eigenschappen, waardoor ze een uitstekend model vormen voor het bestuderen van epitheliale celbiologie, waaronder celpolariteit, transportprocessen en barrièrefunctie

De MDCK-II cellijn is bijzonder waardevol voor het onderzoeken van de mechanismen van virus-gastheer interacties, vooral voor onderzoek naar het influenzavirus. Het vermogen van de cellen om gepolariseerde monolagen te vormen maakt ze ideaal voor het bestuderen van de gerichte vrijlating en verspreiding van virussen. Daarnaast worden MDCK-II cellen vaak gebruikt voor onderzoek naar transport en toxiciteit van medicijnen, omdat hun goed gedefinieerde tight junctions een betrouwbaar model vormen voor het beoordelen van de permeabiliteit en barrièrefunctie van epitheelcellen. Hun responsiviteit op verschillende groeifactoren en hormonen vergroot hun bruikbaarheid in diverse onderzoekstoepassingen nog verder

Onderzoekers gebruiken MDCK-II cellen ook om de nierfysiologie en -pathofysiologie te onderzoeken, gezien hun oorsprong in nierweefsel. Deze cellijn biedt inzicht in de epitheliale celfunctie van de nier, waaronder ionentransport, vochtregulatie en cellulaire reacties op letsel. Over het algemeen zijn MDCK-II cellen een veelzijdig en essentieel hulpmiddel bij het bestuderen van epitheelcelbiologie en verwante biomedische gebieden

Weefsel
Nieren
Ziekte
Normaal niertweevoud
Toepassingen
Virologie; onderzoek naar epitheliaal transport; onderzoek naar tight junctions; permeabiliteitstests voor geneesmiddelen; celbiologie
Synoniemen
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Classificatie

Organisme
Hond
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
Zonder genetisch gemodificeerde organismen
Details over de GGO-status
No genetic modification; wildtype cell line
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheel
Verdubbelingstijd
ongeveer 16-20 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MDCK-II (Cytion catalogusnummer 305233)
NCBI-belastingnummer
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
2 tot 5 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
Cocker Spaniël
Leeftijd van de donor
Volwassen