Премини към съдържанието
Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Нормален бъбречен епител
Синоними
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Документи

MDCK-II

Cell line · Номер на продукта 305233

€750.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) са епителна клетъчна линия, получена от бъбреците на възрастен женски кокер шпаньол. Тези клетки се използват широко в биомедицинските изследвания поради уникалната им способност да образуват плътни връзки и поляризирани монослоеве, които са характерни за епителните тъкани. Клетките MDCK-II притежават стабилни свойства на растеж и диференциация, което ги прави отличен модел за изучаване на биологията на епителните клетки, включително клетъчната полярност, транспортните процеси и бариерната функция

Клетъчната линия MDCK-II е особено ценна за изследване на механизмите на взаимодействие между вирус и гостоприемник, особено за изследване на грипните вируси. Способността на клетките да образуват поляризирани монослоеве ги прави идеални за изследване на насоченото освобождаване и разпространение на вируси. Освен това MDCK-II клетките често се използват при изследвания на преноса на лекарства и токсичността им, тъй като техните добре дефинирани тесни връзки осигуряват надежден модел за оценка на пропускливостта и бариерната функция на епителните клетки. Тяхната чувствителност към различни растежни фактори и хормони допълнително повишава полезността им в различни изследователски приложения

Изследователите използват MDCK-II клетките и за изследване на бъбречната физиология и патофизиология, тъй като произхождат от бъбречна тъкан. Тази клетъчна линия дава представа за функцията на бъбречните епителни клетки, включително преноса на йони, регулирането на течностите и клетъчните реакции при увреждане. Като цяло MDCK-II клетките са универсален и важен инструмент за изследване на биологията на епителните клетки и свързаните с тях биомедицински области

Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Нормален бъбречен епител
Приложения
Вирусология; изследвания на епителния транспорт; изследвания на плътните съединения; тестове за пропускливост на лекарства; клетъчна биология
Синоними
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Класификация

Организъм
Куче
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype cell line
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителиален
Време за удвояване
около 16–20 часа

04Идентификатори

Източник
MDCK-II (каталожен номер 305233 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9615
Целозавър
CVCL_0424

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
2 до 5 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
Кокер шпаньол
Възраст на донора
Възрастни