- Tissue
- כליה
- Disease
- אפיתל כליה תקין
- Synonyms
- MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT
Documents
MDCK-II
Cell line · Product number 305233
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) הם קו תאים אפיתל שמקורם בכליה של נקבת קוקר ספנייל בוגרת. תאים אלה נמצאים בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי בשל יכולתם הייחודית ליצור חיבורים הדוקים ושכבות חד-ממדיות מקוטבות, המאפיינים את רקמות האפיתל. תאי MDCK-II מפגינים תכונות צמיחה והבחנה חזקות, מה שהופך אותם למודל מצוין לחקר ביולוגיה של תאי אפיתל, כולל קוטביות תאים, תהליכי הובלה ותפקוד מחסום
קו התאים MDCK-II הוא בעל ערך רב לחקר מנגנוני האינטראקציה בין נגיפים למאכסנים, במיוחד במחקר על נגיף השפעת. יכולת התאים ליצור שכבות חד-ממדיות מקוטבות הופכת אותם לאידיאליים לחקר שחרור ופיזור ויראליים כיווניים. בנוסף, תאי MDCK-II משמשים לעתים קרובות במחקרים על הובלת תרופות ורעילות, שכן המפגשים ההדוקים והמוגדרים היטב שלהם מספקים מודל אמין להערכת חדירות ותפקוד המחסום של תאי אפיתל. תגובתם לגורמי גדילה והורמונים שונים משפרת עוד יותר את השימושיות שלהם ביישומים מחקריים מגוונים
חוקרים משתמשים בתאי MDCK-II גם לחקר הפיזיולוגיה והפתופיזיולוגיה של הכליות, בשל מקורם ברקמת הכליה. קו תאים זה מספק תובנות על תפקוד תאי האפיתל של הכליה, כולל הובלת יונים, ויסות נוזלים ותגובות תאיות לפגיעה. בסך הכל, תאי MDCK-II הם כלי רב-תכליתי וחיוני בחקר ביולוגיה של תאי אפיתל ובתחומים ביו-רפואיים קשורים
- Tissue
- כליה
- Disease
- אפיתל כליה תקין
- Applications
- וירולוגיה; מחקרים על הובלה אפיתלית; מחקר על חיבורים הדוקים; בדיקות חדירות לתרופות; ביולוגיה תאית
- Synonyms
- MDCK II
- MDCKII
- MDCK2
- MDCK-2
- MDCK Type II
- MDCKII-WT
02Classification
- Organism
- Dog
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype cell line
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- אפיתל
- Doubling time
- כ-16–20 שעות
04Identifiers
- Citation
- MDCK-II (מספר קטלוגי Cytion 305233)
- NCBI TaxID
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_0424
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 5
- Seeding density
- 2 עד 5 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Breed / subspecies
- קוקר ספנייל
- Donor age
- מבוגר
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes