Ir diretamente para o conteúdo
Tecido
Rim
Doença
Epitélio renal normal
Sinónimos
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Documentos

MDCK-II

Cell line · Número do produto 305233

€750.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

As células Madin-Darby Canine Kidney tipo II (MDCK-II) são uma linha celular epitelial derivada do rim de uma fêmea adulta de cocker spaniel. Estas células são amplamente utilizadas na investigação biomédica devido à sua capacidade única de formar junções estreitas e monocamadas polarizadas, que são caraterísticas dos tecidos epiteliais. As células MDCK-II apresentam propriedades robustas de crescimento e diferenciação, o que as torna um excelente modelo para o estudo da biologia das células epiteliais, incluindo a polaridade celular, os processos de transporte e a função de barreira

A linha celular MDCK-II é particularmente valiosa para investigar os mecanismos das interações vírus-hospedeiro, especialmente para a investigação do vírus da gripe. A capacidade das células para formar monocamadas polarizadas torna-as ideais para estudar a libertação direcional e a propagação de vírus. Além disso, as células MDCK-II são frequentemente utilizadas em estudos de transporte e toxicidade de medicamentos, uma vez que as suas junções estreitas bem definidas constituem um modelo fiável para avaliar a permeabilidade e a função de barreira das células epiteliais. A sua capacidade de resposta a vários factores de crescimento e hormonas aumenta ainda mais a sua utilidade em diversas aplicações de investigação

Os investigadores também utilizam as células MDCK-II para explorar a fisiologia e a fisiopatologia renais, dada a sua origem no tecido renal. Esta linha de células fornece informações sobre a função das células epiteliais renais, incluindo o transporte de iões, a regulação de fluidos e as respostas celulares a lesões. De um modo geral, as células MDCK-II são uma ferramenta versátil e essencial para o estudo da biologia das células epiteliais e dos domínios biomédicos conexos

Tecido
Rim
Doença
Epitélio renal normal
Aplicações
Virologia; estudos sobre o transporte epitelial; investigação sobre as junções apertadas; ensaios de permeabilidade a fármacos; biologia celular
Sinónimos
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Classificação

Organismo
Cão
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; wildtype cell line
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Epitelial
Tempo de duplicação
aprox. 16-20 horas

04Identificadores

Referência
MDCK-II (número de catálogo Cytion 305233)
Número de identificação fiscal do NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
2 a 5 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
Cocker Spaniel
Idade do dador
Adulto