- Tecido
- Rim
- Doença
- Epitélio renal normal
- Sinónimos
- MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT
Documentos
MDCK-II
Cell line · Número do produto 305233
Personalização / Recomendações
- MDCK-IICell line€750.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
As células Madin-Darby Canine Kidney tipo II (MDCK-II) são uma linha celular epitelial derivada do rim de uma fêmea adulta de cocker spaniel. Estas células são amplamente utilizadas na investigação biomédica devido à sua capacidade única de formar junções estreitas e monocamadas polarizadas, que são caraterísticas dos tecidos epiteliais. As células MDCK-II apresentam propriedades robustas de crescimento e diferenciação, o que as torna um excelente modelo para o estudo da biologia das células epiteliais, incluindo a polaridade celular, os processos de transporte e a função de barreira
A linha celular MDCK-II é particularmente valiosa para investigar os mecanismos das interações vírus-hospedeiro, especialmente para a investigação do vírus da gripe. A capacidade das células para formar monocamadas polarizadas torna-as ideais para estudar a libertação direcional e a propagação de vírus. Além disso, as células MDCK-II são frequentemente utilizadas em estudos de transporte e toxicidade de medicamentos, uma vez que as suas junções estreitas bem definidas constituem um modelo fiável para avaliar a permeabilidade e a função de barreira das células epiteliais. A sua capacidade de resposta a vários factores de crescimento e hormonas aumenta ainda mais a sua utilidade em diversas aplicações de investigação
Os investigadores também utilizam as células MDCK-II para explorar a fisiologia e a fisiopatologia renais, dada a sua origem no tecido renal. Esta linha de células fornece informações sobre a função das células epiteliais renais, incluindo o transporte de iões, a regulação de fluidos e as respostas celulares a lesões. De um modo geral, as células MDCK-II são uma ferramenta versátil e essencial para o estudo da biologia das células epiteliais e dos domínios biomédicos conexos
- Tecido
- Rim
- Doença
- Epitélio renal normal
- Aplicações
- Virologia; estudos sobre o transporte epitelial; investigação sobre as junções apertadas; ensaios de permeabilidade a fármacos; biologia celular
- Sinónimos
- MDCK II
- MDCKII
- MDCK2
- MDCK-2
- MDCK Type II
- MDCKII-WT
02Classificação
- Organismo
- Cão
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- Sem OGM
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- No genetic modification; wildtype cell line
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tipo de célula
- Epitelial
- Tempo de duplicação
- aprox. 16-20 horas
04Identificadores
- Referência
- MDCK-II (número de catálogo Cytion 305233)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_0424
05Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Rácio de divisão
- 1 a 5
- Densidade de sementeira
- 2 a 5 x 104 células/cm2
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
07Doador
- Raça / subespécie
- Cocker Spaniel
- Idade do dador
- Adulto
08Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim