Skip to content
Tissue
ไต
Disease
เซลล์เยื่อบุไตปกติ
Synonyms
MDCK II, MDCKII, MDCK2, MDCK-2, MDCK Type II, MDCKII-WT

Documents

MDCK-II

Cell line · Product number 305233

€750.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ Madin-Darby Canine Kidney type II (MDCK-II) เป็นสายพันธุ์เซลล์เยื่อบุผิวที่ได้มาจากไตของสุนัขพันธุ์ค็อกเกอร์สแปเนียลเพศเมียที่โตเต็มวัย เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์เนื่องจากความสามารถพิเศษในการสร้างรอยต่อที่แน่นหนาและชั้นเซลล์ที่มีขั้ว ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของเนื้อเยื่อเยื่อบุผิวเซลล์ MDCK-II แสดงคุณสมบัติการเจริญเติบโตและการเปลี่ยนแปลงที่แข็งแกร่ง ทำให้เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเซลล์เยื่อบุผิว รวมถึงความมีขั้วของเซลล์ กระบวนการขนส่ง และหน้าที่ของสิ่งกีดขวาง

สายพันธุ์เซลล์ MDCK-II มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาเกี่ยวกับกลไกการปฏิสัมพันธ์ระหว่างไวรัสกับโฮสต์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยเกี่ยวกับไวรัสไข้หวัดใหญ่ความสามารถของเซลล์ในการสร้างชั้นเดียวที่มีการจัดเรียงตัวแบบมีขั้วทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาการปล่อยและการแพร่กระจายของไวรัสในทิศทางเฉพาะ นอกจากนี้ เซลล์ MDCK-II ยังถูกนำมาใช้บ่อยในการศึกษาการขนส่งยาและความเป็นพิษ เนื่องจากรอยต่อที่แน่นหนาซึ่งมีลักษณะชัดเจนของเซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่เชื่อถือได้สำหรับการประเมินการซึมผ่านและหน้าที่ของเกราะป้องกันของเซลล์เยื่อบุผิว ความไวต่อปัจจัยการเจริญเติบโตและฮอร์โมนต่างๆ ยังช่วยเพิ่มประโยชน์ในการประยุกต์ใช้ในงานวิจัยที่หลากหลายอีกด้วย

นักวิจัยยังใช้เซลล์ MDCK-II ในการศึกษาสรีรวิทยาและพยาธิสรีรวิทยาของไต เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อไต สายเซลล์นี้ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการทำงานของเซลล์เยื่อบุผิวไต รวมถึงการขนส่งไอออน การควบคุมของเหลว และการตอบสนองของเซลล์ต่อการบาดเจ็บ โดยรวมแล้ว เซลล์ MDCK-II เป็นเครื่องมือที่หลากหลายและสำคัญในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวและสาขาชีวการแพทย์ที่เกี่ยวข้อง

Tissue
ไต
Disease
เซลล์เยื่อบุไตปกติ
Applications
ไวรัสวิทยา; การศึกษาการขนส่งในเซลล์เยื่อบุ; การวิจัยเกี่ยวกับจุดเชื่อมต่อแน่น; การทดสอบความซึมผ่านของยา; ชีววิทยาเซลล์
Synonyms
  • MDCK II
  • MDCKII
  • MDCK2
  • MDCK-2
  • MDCK Type II
  • MDCKII-WT

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เยื่อบุผิว
Doubling time
ประมาณ 16-20 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
MDCK-II (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305233)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_0424

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
2 ถึง 5 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
ค็อกเกอร์ สแปเนียล
Donor age
ผู้ใหญ่