TMD8

La lignée cellulaire TMD8 est un modèle humain de lymphome diffus à grandes cellules B (DLBCL) représentatif du sous-type ABC (activated B-cell-like). Ce sous-type se caractérise par une activation constitutive de la voie NF-κB, essentielle à la survie cellulaire. Le TMD8 présente un CARD11 de type sauvage, mais maintient une forte activité NF-κB, ce qui indique une dépendance à l'égard d'une signalisation active chronique du récepteur des cellules B (BCR). Cette dépendance est étayée par des preuves expérimentales montrant que l'élimination des composants de la voie BCR - y compris BTK, CD79A, CD79B et IgM - entraîne la mort cellulaire dans les cellules TMD8. En outre, les cellules TMD8 présentent une mutation Y196H dans le domaine ITAM du CD79B, une mutation couramment rencontrée dans les cellules ABC-DLBCL qui renforce l'expression du BCR en surface et atténue la rétroaction négative de la kinase Lyn, favorisant ainsi une activité de signalisation soutenue.

Les cellules TMD8 présentent également une sensibilité notable à l'inhibition de BCL-2 par le venetoclax lorsqu'elles expriment des niveaux élevés de la protéine BCL-2. Cependant, la résistance au vénétoclax dans ces cellules peut être médiée par l'activation de la voie PI3K/AKT, en particulier après une exposition prolongée au médicament. Ce mécanisme de résistance implique une réduction de l'expression de PTEN et une augmentation de la phosphorylation d'AKT. Les cellules TMD8 présentant une résistance acquise au vénétoclax sont plus sensibles à l'inhibition pharmacologique de la voie PI3K/AKT, ce qui en fait un modèle approprié pour l'étude des combinaisons thérapeutiques visant à surmonter la résistance dans les lymphomes agressifs à cellules B.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie