TMD8

Bunková línia TMD8 je modelom ľudského difúzneho veľkobunkového B-lymfómu (DLBCL), ktorý predstavuje podtyp ABC (activated B-cell-like). Tento podtyp sa vyznačuje konštitutívnou aktiváciou dráhy NF-κB, ktorá je nevyhnutná pre prežitie buniek. TMD8 vykazuje divoký typ CARD11, napriek tomu si zachováva silnú aktivitu NF-κB, čo naznačuje závislosť od chronickej aktívnej signalizácie B-bunkového receptora (BCR). Túto závislosť podporujú experimentálne dôkazy, ktoré ukazujú, že vyradenie zložiek dráhy BCR - vrátane BTK, CD79A, CD79B a IgM - vedie k bunkovej smrti v bunkách TMD8. Okrem toho TMD8 obsahuje mutáciu Y196H v ITAM doméne CD79B, mutáciu, ktorá sa bežne vyskytuje v ABC-DLBCL, ktorá zvyšuje povrchovú expresiu BCR a oslabuje negatívnu spätnú väzbu od Lyn kinázy, čím podporuje trvalú signalizačnú aktivitu.

Bunky TMD8 tiež vykazujú pozoruhodnú citlivosť na inhibíciu BCL-2 prostredníctvom venetoklaxu, keď exprimujú vysoké hladiny proteínu BCL-2. Rezistencia na venetoklax v takýchto bunkách však môže byť sprostredkovaná aktiváciou dráhy PI3K/AKT, najmä po dlhodobej expozícii lieku. Tento mechanizmus rezistencie zahŕňa zníženie expresie PTEN a zvýšenú fosforyláciu AKT. Bunky TMD8 so získanou rezistenciou na venetoklax vykazujú zvýšenú citlivosť na farmakologickú inhibíciu dráhy PI3K/AKT, čo z nich robí vhodný model na štúdium terapeutických kombinácií zameraných na prekonanie rezistencie u agresívnych B-bunkových lymfómov.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke