TMD8

Die TMD8-Zelllinie ist ein menschliches Modell des diffusen großzelligen B-Zell-Lymphoms (DLBCL), das den Subtyp der aktivierten B-Zellen (ABC) repräsentiert. Dieser Subtyp zeichnet sich durch eine konstitutive Aktivierung des NF-κB-Signalwegs aus, der für das Überleben der Zellen wesentlich ist. TMD8 weist einen Wildtyp von CARD11 auf, behält jedoch eine starke NF-κB-Aktivität bei, was auf eine Abhängigkeit von chronisch aktiven B-Zell-Rezeptor (BCR)-Signalen hinweist. Diese Abhängigkeit wird durch experimentelle Beweise gestützt, die zeigen, dass die Ausschaltung von Komponenten des BCR-Signalwegs - einschließlich BTK, CD79A, CD79B und IgM - zum Zelltod in TMD8-Zellen führt. Darüber hinaus weist TMD8 eine Y196H-Mutation in der ITAM-Domäne von CD79B auf, eine Mutation, die häufig bei ABC-DLBCLs zu finden ist und die die BCR-Expression an der Oberfläche verstärkt und die negative Rückkopplung durch die Lyn-Kinase abschwächt, wodurch eine anhaltende Signalaktivität gefördert wird.

TMD8-Zellen zeigen auch eine bemerkenswerte Empfindlichkeit gegenüber der Hemmung von BCL-2 durch Venetoclax, wenn sie hohe Mengen des BCL-2-Proteins exprimieren. Allerdings kann die Resistenz gegen Venetoclax in solchen Zellen durch die Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs vermittelt werden, insbesondere nach längerer Medikamenteneinwirkung. Dieser Resistenzmechanismus beinhaltet eine Verringerung der PTEN-Expression und eine erhöhte AKT-Phosphorylierung. TMD8-Zellen mit einer erworbenen Resistenz gegen Venetoclax weisen eine erhöhte Empfindlichkeit gegenüber einer pharmakologischen Hemmung des PI3K/AKT-Signalwegs auf, was sie zu einem geeigneten Modell für die Untersuchung von Therapiekombinationen macht, mit denen die Resistenz bei aggressiven B-Zell-Lymphomen überwunden werden soll.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung