TMD8

TMD8 šūnu līnija ir cilvēka difūzās lielo B šūnu limfomas (DLBCL) modelis, kas pārstāv aktivēto B šūnu (ABC) apakštipu. Šim apakštipam raksturīga konstitīva NF-κB ceļa aktivācija, kas ir būtiska šūnu izdzīvošanai. TMD8 piemīt savvaļas tipa CARD11, tomēr tā saglabā spēcīgu NF-κB aktivitāti, kas norāda uz atkarību no hroniski aktīvas B-šūnu receptoru (BCR) signalizācijas. Šo atkarību apstiprina eksperimentāli pierādījumi, kas liecina, ka BCR ceļa komponentu, tostarp BTK, CD79A, CD79B un IgM, nomākšana izraisa TMD8 šūnu nāvi. Turklāt TMD8 piemīt Y196H mutācija CD79B ITAM domēnā - mutācija, kas bieži sastopama ABC-DLBCL, kas pastiprina virsmas BCR ekspresiju un vājina Lyn kināzes negatīvo atgriezenisko saiti, tādējādi veicinot ilgstošu signalizācijas aktivitāti.

TMD8 šūnas arī izrāda ievērojamu jutību pret BCL-2 inhibīciju, izmantojot venetoklaksu, ja tās ekspresē augstu BCL-2 proteīna līmeni. Tomēr rezistenci pret venetoklaksu šādās šūnās var izraisīt PI3K/AKT ceļa aktivācija, īpaši pēc ilgstošas zāļu iedarbības. Šis rezistences mehānisms ietver PTEN ekspresijas samazināšanos un pastiprinātu AKT fosforilēšanu. TMD8 šūnām ar iegūtu rezistenci pret venetoklaksu piemīt paaugstināta jutība pret farmakoloģisku PI3K/AKT ceļa inhibīciju, padarot tās par piemērotu modeli terapeitisko kombināciju izpētei, lai pārvarētu rezistenci agresīvu B šūnu limfomu gadījumā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu