TMD8

Celična linija TMD8 je model človeškega difuznega velikoceličnega limfoma B (DLBCL), ki predstavlja podtip ABC (activated B-cell-like). Za ta podtip je značilna konstitutivna aktivacija poti NF-κB, ki je bistvena za preživetje celic. TMD8 ima CARD11 divjega tipa, vendar ohranja močno aktivnost NF-κB, kar kaže na odvisnost od kronične aktivne signalizacije celičnega receptorja B (BCR). To odvisnost potrjujejo eksperimentalni dokazi, ki kažejo, da izbitje komponent poti BCR, vključno z BTK, CD79A, CD79B in IgM, povzroči celično smrt v celicah TMD8. Poleg tega ima TMD8 mutacijo Y196H v domeni ITAM CD79B, mutacijo, ki jo pogosto najdemo pri ABC-DLBCL, ki poveča izražanje BCR na površini in omili negativne povratne informacije kinaze Lyn ter tako spodbuja trajno signalno aktivnost.

Celice TMD8 kažejo tudi izrazito občutljivost na zaviranje BCL-2 z venetoklaksom, kadar izražajo visoke ravni beljakovine BCL-2. Vendar je lahko odpornost na venetoklaks v takih celicah posledica aktivacije poti PI3K/AKT, zlasti po daljši izpostavljenosti zdravilu. Ta mehanizem odpornosti vključuje zmanjšanje izražanja PTEN in povečano fosforilacijo AKT. Celice TMD8 s pridobljeno odpornostjo na venetoklaks kažejo povečano občutljivost na farmakološko zaviranje poti PI3K/AKT, zato so primeren model za preučevanje terapevtskih kombinacij, namenjenih premagovanju odpornosti pri agresivnih limfomih celic B.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo