TMD8

La linea cellulare TMD8 è un modello umano di linfoma diffuso a grandi cellule B (DLBCL) rappresentativo del sottotipo attivato a cellule B (ABC). Questo sottotipo è caratterizzato dall'attivazione costitutiva della via NF-κB, essenziale per la sopravvivenza cellulare. TMD8 presenta CARD11 di tipo selvatico, ma mantiene una forte attività NF-κB, indicando una dipendenza dalla segnalazione cronica attiva del recettore delle cellule B (BCR). Questa dipendenza è supportata da prove sperimentali che dimostrano che l'abbattimento dei componenti della via BCR, tra cui BTK, CD79A, CD79B e IgM, porta alla morte cellulare nelle cellule TMD8. Inoltre, TMD8 presenta una mutazione Y196H nel dominio ITAM di CD79B, una mutazione comunemente riscontrata negli ABC-DLBCL che aumenta l'espressione del BCR di superficie e attenua il feedback negativo della chinasi Lyn, promuovendo così un'attività di segnalazione sostenuta.

Le cellule TMD8 dimostrano anche una notevole sensibilità all'inibizione di BCL-2 tramite venetoclax quando esprimono alti livelli di proteina BCL-2. Tuttavia, la resistenza a venetoclax è molto bassa. Tuttavia, la resistenza a venetoclax in queste cellule può essere mediata dall'attivazione della via PI3K/AKT, in particolare dopo un'esposizione prolungata al farmaco. Questo meccanismo di resistenza comporta una riduzione dell'espressione di PTEN e un aumento della fosforilazione di AKT. Le cellule TMD8 con resistenza acquisita a venetoclax mostrano una maggiore suscettibilità all'inibizione farmacologica della via PI3K/AKT, che le rende un modello adatto per lo studio di combinazioni terapeutiche volte a superare la resistenza nei linfomi aggressivi a cellule B.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia