TMD8

A TMD8 sejtvonal egy humán diffúz nagy B-sejtes limfóma (DLBCL) modell, amely az aktivált B-sejt-szerű (ABC) altípust képviseli. Ezt az altípust az NF-κB útvonal konstitutív aktivációja jellemzi, amely elengedhetetlen a sejtek túléléséhez. A TMD8 vad típusú CARD11-et mutat, mégis erős NF-κB-aktivitást tart fenn, ami a krónikus aktív B-sejt-receptor (BCR) jelátviteltől való függőséget jelzi. Ezt a függőséget alátámasztják azok a kísérleti bizonyítékok, amelyek azt mutatják, hogy a BCR-útvonal komponenseinek - beleértve a BTK-t, a CD79A-t, a CD79B-t és az IgM-et - kiütése a TMD8 sejtekben sejthalálhoz vezet. Ezenkívül a TMD8 a CD79B ITAM doménjében Y196H mutációt tartalmaz, amely mutáció gyakran megtalálható az ABC-DLBCL sejtekben, és amely fokozza a felszíni BCR-expressziót, és csökkenti a Lyn-kináz negatív visszacsatolását, így elősegíti a tartós jelátviteli aktivitást.

A TMD8 sejtek a BCL-2 fehérje magas szintű expressziója esetén is figyelemre méltó érzékenységet mutatnak a venetoklaxon keresztül történő BCL-2-gátlásra. Az ilyen sejtekben a venetoklaxszal szembeni rezisztencia azonban a PI3K/AKT útvonal aktiválódása által közvetíthető, különösen a hosszan tartó gyógyszer-expozíciót követően. Ez a rezisztencia mechanizmus a PTEN-expresszió csökkenésével és az AKT foszforiláció növekedésével jár. A venetoklaxra szerzett rezisztenciával rendelkező TMD8 sejtek fokozott érzékenységet mutatnak a farmakológiai PI3K/AKT útvonal gátlásával szemben, így alkalmas modellnek bizonyulnak az agresszív B-sejtes limfómák rezisztenciájának leküzdését célzó terápiás kombinációk vizsgálatára.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban