TMD8

Linia komórkowa TMD8 jest ludzkim modelem chłoniaka rozlanego z dużych komórek B (DLBCL) reprezentatywnym dla podtypu aktywowanych komórek B (ABC). Podtyp ten charakteryzuje się konstytutywną aktywacją szlaku NF-κB, który jest niezbędny do przeżycia komórek. TMD8 wykazuje dziki typ CARD11, ale utrzymuje silną aktywność NF-κB, wskazując na zależność od przewlekłej aktywnej sygnalizacji receptora komórek B (BCR). Zależność ta jest poparta eksperymentalnymi dowodami wskazującymi, że knockdown składników szlaku BCR - w tym BTK, CD79A, CD79B i IgM - prowadzi do śmierci komórek TMD8. Dodatkowo, TMD8 są nosicielami mutacji Y196H w domenie ITAM CD79B, mutacji powszechnie występującej w ABC-DLBCL, która zwiększa powierzchniową ekspresję BCR i osłabia ujemne sprzężenie zwrotne z kinazą Lyn, promując w ten sposób trwałą aktywność sygnalizacyjną.

Komórki TMD8 wykazują również znaczną wrażliwość na hamowanie BCL-2 przez wenetoklaks, gdy wyrażają wysoki poziom białka BCL-2. Jednak oporność na wenetoklaks w takich komórkach może być pośredniczona przez aktywację szlaku PI3K/AKT, szczególnie po przedłużonej ekspozycji na lek. Ten mechanizm oporności obejmuje zmniejszenie ekspresji PTEN i zwiększoną fosforylację AKT. Komórki TMD8 z nabytą opornością na wenetoklaks wykazują zwiększoną podatność na farmakologiczne hamowanie szlaku PI3K/AKT, co czyni je odpowiednim modelem do badania kombinacji terapeutycznych mających na celu przezwyciężenie oporności w agresywnych chłoniakach z komórek B.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym