TMD8

קו התאים TMD8 הוא מודל של לימפומה מפושטת של תאי B גדולים (DLBCL) בבני אדם, המייצג את תת-הסוג המופעל דמוי תאי B (ABC). תת-סוג זה מאופיין בהפעלה קונסטיטוטבית של מסלול NF-κB, החיוני להישרדות התאים. TMD8 מציג CARD11 מסוג בר, אך שומר על פעילות NF-κB חזקה, מה שמעיד על תלות באיתות כרוני של קולטן תאי B (BCR) פעיל. תלות זו נתמכת על ידי ראיות ניסוייות המראות כי דיכוי של רכיבי מסלול BCR — כולל BTK, CD79A, CD79B ו-IgM — מוביל למוות תאי בתאי TMD8. בנוסף, TMD8 נושא מוטציה Y196H בתחום ITAM של CD79B, מוטציה הנפוצה ב-ABC-DLBCLs, המשפרת את ביטוי BCR על פני השטח ומחלישה את המשוב השלילי מ-Lyn kinase, ובכך מקדמת פעילות איתות מתמשכת.

תאי TMD8 מפגינים גם רגישות בולטת לעיכוב BCL-2 באמצעות venetoclax כאשר הם מבטאים רמות גבוהות של חלבון BCL-2. עם זאת, עמידות ל-venetoclax בתאים אלה יכולה להיות מתווכת על ידי הפעלת מסלול PI3K/AKT, במיוחד לאחר חשיפה ממושכת לתרופה. מנגנון עמידות זה כרוך בירידה בביטוי PTEN ועלייה בזרחון AKT. תאי TMD8 עם עמידות נרכשת ל-venetoclax מפגינים רגישות מוגברת לעיכוב מסלול PI3K/AKT פרמקולוגי, מה שהופך אותם למודל מתאים לחקר שילובים טיפוליים שמטרתם להתגבר על עמידות בלימפומות תוקפניות של תאי B.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו