TMD8

TMD8-cellelinjen er en human modell for diffust storcellet B-celle-lymfom (DLBCL) som er representativ for den aktiverte B-cellelignende (ABC) subtypen. Denne subtypen kjennetegnes av konstitutiv aktivering av NF-κB-banen, som er avgjørende for celleoverlevelse. TMD8 har CARD11 av villtype, men opprettholder likevel en sterk NF-κB-aktivitet, noe som indikerer en avhengighet av kronisk aktiv B-cellereseptor (BCR)-signalering. Denne avhengigheten underbygges av eksperimentelle studier som viser at knockdown av BCR-komponenter - inkludert BTK, CD79A, CD79B og IgM - fører til celledød i TMD8-celler. I tillegg har TMD8 en Y196H-mutasjon i ITAM-domenet til CD79B, en mutasjon som ofte forekommer i ABC-DLBCL-celler, og som øker BCR-uttrykket på overflaten og demper den negative feedbacken fra Lyn-kinase, og dermed fremmer vedvarende signalaktivitet.

TMD8-celler viser også en bemerkelsesverdig følsomhet for BCL-2-inhibering via venetoklax når de uttrykker høye nivåer av BCL-2-proteinet. Resistens mot venetoklaks i slike celler kan imidlertid medieres av aktivering av PI3K/AKT-stien, særlig etter langvarig eksponering for legemiddelet. Denne resistensmekanismen innebærer en reduksjon i PTEN-ekspresjon og økt AKT-fosforylering. TMD8-celler med ervervet resistens mot venetoklaks viser økt følsomhet for farmakologisk hemming av PI3K/AKT-stien, noe som gjør dem til en egnet modell for å studere terapeutiske kombinasjoner med sikte på å overvinne resistens i aggressive B-celle-lymfomer.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring