TMD8

TMD8-cellelinjen er en human diffus storcellet B-celle-lymfom (DLBCL)-model, der er repræsentativ for den aktiverede B-celle-lignende (ABC) subtype. Denne subtype er kendetegnet ved konstitutiv aktivering af NF-κB-stien, som er afgørende for celleoverlevelse. TMD8 udviser wild-type CARD11, men opretholder alligevel en stærk NF-κB-aktivitet, hvilket indikerer en afhængighed af kronisk aktiv B-cellereceptor (BCR)-signalering. Denne afhængighed understøttes af eksperimentelle beviser, der viser, at knockdown af BCR-vejens komponenter - herunder BTK, CD79A, CD79B og IgM - fører til celledød i TMD8-celler. Derudover har TMD8 en Y196H-mutation i ITAM-domænet i CD79B, en mutation, der ofte findes i ABC-DLBCL'er, og som øger BCR-ekspressionen på overfladen og dæmper negativ feedback fra Lyn-kinase, hvilket fremmer vedvarende signalaktivitet.

TMD8-celler udviser også betydelig følsomhed over for BCL-2-hæmning via venetoclax, når de udtrykker høje niveauer af BCL-2-proteinet. Men resistens over for venetoclax i sådanne celler kan medieres af aktivering af PI3K/AKT-vejen, især efter langvarig eksponering for lægemidlet. Denne resistensmekanisme involverer en reduktion i PTEN-ekspression og øget AKT-phosphorylering. TMD8-celler med erhvervet resistens over for venetoclax udviser øget følsomhed over for farmakologisk PI3K/AKT-hæmning, hvilket gør dem til en velegnet model til undersøgelse af terapeutiske kombinationer, der har til formål at overvinde resistens i aggressive B-celle-lymfomer.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring