TMD8

TMD8-solulinja on ihmisen diffuusi suurisoluinen B-solulymfooma (DLBCL), joka edustaa aktivoitujen B-solujen kaltaista (ABC) alatyyppiä. Tälle alatyypille on ominaista solujen eloonjäämisen kannalta olennaisen tärkeän NF-κB-reitin konstitutiivinen aktivoituminen. TMD8:lla on villityyppinen CARD11, mutta se säilyttää voimakkaan NF-κB-aktiivisuuden, mikä osoittaa riippuvuutta kroonisesti aktiivisesta B-solureseptorin (BCR) signaloinnista. Tätä riippuvuutta tukevat kokeelliset todisteet, jotka osoittavat, että BCR-reitin komponenttien, kuten BTK:n, CD79A:n, CD79B:n ja IgM:n, tyrmäys johtaa solukuolemaan TMD8-soluissa. Lisäksi TMD8:ssa on Y196H-mutaatio CD79B:n ITAM-domeenissa, mutaatio, jota tavataan yleisesti ABC-DLBCL-soluissa ja joka lisää BCR:n pintaekspressiota ja heikentää Lyn-kinaasin negatiivista palautetta, mikä edistää jatkuvaa signalointiaktiivisuutta.

TMD8-solut osoittavat myös huomattavaa herkkyyttä BCL-2:n estolle venetoklaxin avulla, kun BCL-2-proteiinia ilmentyy runsaasti. Tällaisten solujen venetoklaxiresistenssi voi kuitenkin johtua PI3K/AKT-reitin aktivoitumisesta, erityisesti pitkäaikaisen lääkealtistuksen jälkeen. Tähän resistenssimekanismiin liittyy PTEN-ekspression väheneminen ja lisääntynyt AKT-fosforylaatio. TMD8-solut, joilla on hankittu resistenssi venetoklaxille, ovat herkempiä farmakologiselle PI3K/AKT-reitin estolle, joten ne ovat sopiva malli aggressiivisten B-solulymfoomien resistenssin voittamiseen tähtäävien terapeuttisten yhdistelmien tutkimiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa