TMD8

Buněčná linie TMD8 je model lidského difuzního velkobuněčného B-lymfomu (DLBCL), který představuje podtyp ABC (activated B-cell-like). Tento podtyp se vyznačuje konstitutivní aktivací dráhy NF-κB, která je nezbytná pro přežití buněk. TMD8 vykazuje divoký typ CARD11, přesto si zachovává silnou aktivitu NF-κB, což ukazuje na závislost na chronické aktivní signalizaci B-buněčného receptoru (BCR). Tuto závislost podporují experimentální důkazy, které ukazují, že vyřazení komponent dráhy BCR - včetně BTK, CD79A, CD79B a IgM - vede u buněk TMD8 k buněčné smrti. TMD8 navíc obsahuje mutaci Y196H v ITAM doméně CD79B, což je mutace běžně se vyskytující u ABC-DLBCL, která zvyšuje povrchovou expresi BCR a oslabuje negativní zpětnou vazbu od Lyn kinázy, čímž podporuje trvalou signální aktivitu.

Buňky TMD8 rovněž vykazují pozoruhodnou citlivost na inhibici BCL-2 prostřednictvím venetoklaxu, pokud exprimují vysoké hladiny proteinu BCL-2. Rezistence k venetoklaxu však může být u těchto buněk zprostředkována aktivací dráhy PI3K/AKT, zejména po delší expozici léku. Tento mechanismus rezistence zahrnuje snížení exprese PTEN a zvýšenou fosforylaci AKT. Buňky TMD8 se získanou rezistencí k venetoklaxu vykazují zvýšenou citlivost k farmakologické inhibici dráhy PI3K/AKT, což z nich činí vhodný model pro studium terapeutických kombinací zaměřených na překonání rezistence u agresivních B-buněčných lymfomů.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení