TMD8

Клетъчната линия TMD8 е модел на човешки дифузен едроклетъчен В-лимфом (DLBCL), който е представител на подтипа ABC (activated B-cell-like). Този подтип се характеризира с конститутивно активиране на пътя NF-κB, който е от съществено значение за оцеляването на клетките. TMD8 показва див тип CARD11, но въпреки това поддържа силна NF-κB активност, което показва зависимост от хронично активен B-клетъчен рецептор (BCR). Тази зависимост се подкрепя от експериментални данни, показващи, че отстраняването на компонентите на BCR пътя - включително BTK, CD79A, CD79B и IgM - води до клетъчна смърт в клетките на TMD8. Освен това TMD8 притежава мутация Y196H в ITAM домейна на CD79B - мутация, често срещана при ABC-DLBCL, която повишава повърхностната BCR експресия и отслабва отрицателната обратна връзка от Lyn киназата, като по този начин насърчава устойчивата сигнална активност.

Клетките TMD8 също така демонстрират забележителна чувствителност към инхибиране на BCL-2 чрез venetoclax, когато експресират високи нива на протеина BCL-2. Въпреки това резистентността към venetoclax в такива клетки може да се дължи на активиране на пътя PI3K/AKT, особено след продължително излагане на лекарството. Този механизъм на резистентност включва намаляване на експресията на PTEN и повишено фосфорилиране на AKT. Клетките TMD8 с придобита резистентност към venetoclax проявяват повишена чувствителност към фармакологично инхибиране на пътя PI3K/AKT, което ги прави подходящ модел за изучаване на терапевтични комбинации, насочени към преодоляване на резистентността при агресивни В-клетъчни лимфоми.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация