TMD8

Dòng tế bào TMD8 là mô hình ung thư hạch B lớn lan tỏa (DLBCL) ở người, đại diện cho thể ABC (activated B-cell-like). Thể này được đặc trưng bởi sự kích hoạt liên tục của con đường NF-κB, yếu tố thiết yếu cho sự sống còn của tế bào. TMD8 có CARD11 kiểu hoang dã, nhưng vẫn duy trì hoạt động mạnh mẽ của NF-κB, cho thấy sự phụ thuộc vào tín hiệu thụ thể B-cell (BCR) hoạt động mãn tính. Sự phụ thuộc này được hỗ trợ bởi bằng chứng thực nghiệm cho thấy việc ức chế các thành phần của con đường BCR—bao gồm BTK, CD79A, CD79B và IgM—dẫn đến cái chết của tế bào TMD8. Ngoài ra, TMD8 mang đột biến Y196H trong miền ITAM của CD79B, một đột biến thường gặp trong ABC-DLBCLs, làm tăng biểu hiện thụ thể B trên bề mặt và làm giảm phản hồi tiêu cực từ kinase Lyn, từ đó thúc đẩy hoạt động tín hiệu liên tục.

Các tế bào TMD8 cũng thể hiện độ nhạy cao đối với ức chế BCL-2 thông qua venetoclax khi biểu hiện mức độ cao của protein BCL-2. Tuy nhiên, sự kháng thuốc venetoclax trong các tế bào này có thể được trung gian bởi sự kích hoạt con đường PI3K/AKT, đặc biệt sau khi tiếp xúc kéo dài với thuốc. Cơ chế kháng thuốc này liên quan đến sự giảm biểu hiện PTEN và tăng phosphoryl hóa AKT. Các tế bào TMD8 có kháng thuốc venetoclax đã phát triển biểu hiện độ nhạy cao hơn đối với ức chế dược lý con đường PI3K/AKT, khiến chúng trở thành mô hình phù hợp để nghiên cứu các kết hợp điều trị nhằm vượt qua sự kháng thuốc trong các u lympho B ác tính.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.