TMD8

TMD8 hücre hattı, aktive B-hücresi benzeri (ABC) alt tipini temsil eden bir insan diffüz büyük B-hücreli lenfoma (DLBCL) modelidir. Bu alt tip, hücre sağkalımı için gerekli olan NF-κB yolağının yapısal aktivasyonu ile karakterize edilir. TMD8 vahşi tip CARD11 sergiler, ancak güçlü NF-κB aktivitesini korur, bu da kronik aktif B-hücresi reseptörü (BCR) sinyaline bağımlılığı gösterir. Bu bağımlılık, BTK, CD79A, CD79B ve IgM dahil olmak üzere BCR yolu bileşenlerinin devreden çıkarılmasının TMD8 hücrelerinde hücre ölümüne yol açtığını gösteren deneysel kanıtlarla desteklenmektedir. Ayrıca TMD8, CD79B'nin ITAM alanında, ABC-DLBCL'lerde yaygın olarak bulunan bir mutasyon olan ve yüzey BCR ifadesini artıran ve Lyn kinazdan gelen negatif geri bildirimi zayıflatan, böylece sürekli sinyal aktivitesini destekleyen bir Y196H mutasyonu barındırır.

TMD8 hücreleri ayrıca BCL-2 proteininin yüksek seviyelerini ifade ederken venetoklaks yoluyla BCL-2 inhibisyonuna karşı kayda değer bir hassasiyet gösterir. Bununla birlikte, bu tür hücrelerde venetoklaksa karşı direnç, özellikle uzun süreli ilaca maruz kalmanın ardından PI3K/AKT yolunun aktivasyonu ile sağlanabilir. Bu direnç mekanizması PTEN ekspresyonunda azalma ve AKT fosforilasyonunda artış içerir. Venetoklaksa karşı edinilmiş direnci olan TMD8 hücreleri, farmakolojik PI3K/AKT yolağı inhibisyonuna karşı yüksek duyarlılık sergileyerek agresif B hücreli lenfomalarda direncin üstesinden gelmeyi amaçlayan terapötik kombinasyonların incelenmesi için uygun bir model oluşturur.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın