TMD8

Garis sel TMD8 adalah model limfoma sel B besar yang menyebar pada manusia (DLBCL) yang mewakili subtipe sel B yang teraktivasi (ABC). Subtipe ini ditandai dengan aktivasi konstitutif jalur NF-κB, yang penting untuk kelangsungan hidup sel. TMD8 menunjukkan CARD11 tipe liar, namun mempertahankan aktivitas NF-κB yang kuat, yang menunjukkan ketergantungan pada pensinyalan reseptor sel B aktif kronis (BCR). Ketergantungan ini didukung oleh bukti eksperimental yang menunjukkan bahwa knockdown komponen jalur BCR - termasuk BTK, CD79A, CD79B, dan IgM - menyebabkan kematian sel pada sel TMD8. Selain itu, TMD8 memiliki mutasi Y196H di domain ITAM dari CD79B, mutasi yang umumnya ditemukan pada ABC-DLBCL yang meningkatkan ekspresi BCR permukaan dan melemahkan umpan balik negatif dari Lyn kinase, sehingga mendorong aktivitas pensinyalan yang berkelanjutan.

Sel TMD8 juga menunjukkan sensitivitas yang menonjol terhadap penghambatan BCL-2 melalui venetoclax ketika mengekspresikan protein BCL-2 tingkat tinggi. Namun, resistensi terhadap venetoclax pada sel tersebut dapat dimediasi oleh aktivasi jalur PI3K/AKT, terutama setelah paparan obat yang berkepanjangan. Mekanisme resistensi ini melibatkan pengurangan ekspresi PTEN dan peningkatan fosforilasi AKT. Sel TMD8 dengan resistensi yang didapat terhadap venetoclax menunjukkan kerentanan yang meningkat terhadap penghambatan jalur PI3K / AKT farmakologis, menjadikannya model yang cocok untuk mempelajari kombinasi terapeutik yang bertujuan untuk mengatasi resistensi pada limfoma sel B yang agresif.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami