TMD8

La lignée cellulaire TMD8 est un modèle de lymphome diffus à grandes cellules B (DLBCL) humain représentatif du sous-type de type « cellules B activées » (ABC). Ce sous-type se caractérise par une activation constitutive de la voie NF-κB, essentielle à la survie cellulaire. La lignée TMD8 présente le gène CARD11 de type sauvage, tout en conservant une forte activité de NF-κB, ce qui indique une dépendance à l’égard de la signalisation chronique du récepteur des cellules B (BCR). Cette dépendance est corroborée par des données expérimentales démontrant que l’inhibition des composants de la voie du BCR — notamment BTK, CD79A, CD79B et l’IgM — entraîne la mort cellulaire des cellules TMD8. De plus, les cellules TMD8 portent une mutation Y196H dans le domaine ITAM de CD79B, une mutation couramment observée dans les ABC-DLBCL qui augmente l’expression du BCR en surface et atténue la rétroaction négative de la kinase Lyn, favorisant ainsi une activité de signalisation soutenue.

Les cellules TMD8 présentent également une sensibilité notable à l’inhibition de BCL-2 par le vénétoclax lorsqu’elles expriment des niveaux élevés de la protéine BCL-2. Cependant, la résistance au vénétoclax dans ces cellules peut être médiée par l’activation de la voie PI3K/AKT, en particulier à la suite d’une exposition prolongée au médicament. Ce mécanisme de résistance implique une réduction de l’expression de PTEN et une phosphorylation accrue de l’AKT. Les cellules TMD8 ayant acquis une résistance au vénétoclax présentent une sensibilité accrue à l’inhibition pharmacologique de la voie PI3K/AKT, ce qui en fait un modèle approprié pour l’étude d’associations thérapeutiques visant à surmonter la résistance dans les lymphomes agressifs à cellules B.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.