HROC222 T1 M2

HROC222 T1 M2 est une lignée cellulaire humaine d'adénocarcinome colorectal établie dans la collection de modèles HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) à partir d'une tumeur primaire réséquée chez un patient adulte. La désignation « T1 » indique que l'échantillon a été prélevé lors de la première intervention chirurgicale, tandis que « M2 » désigne le modèle in vitro correspondant généré à partir de cette tumeur. La plateforme HROC intègre une biobanque complète, une annotation moléculaire standardisée et la création parallèle de xénogreffes dérivées de patients (PDX) et de lignées cellulaires permanentes à faible passage, permettant ainsi la mise en place de modèles de recherche translationnelle annotés cliniquement.

La génération de HROC222 T1 M2 a suivi des procédures standardisées impliquant la dissociation mécanique de tissus tumoraux fraîchement réséqués, la préparation de suspensions de cellules uniques et l'ensemencement sur des plaques de culture recouvertes de collagène dans un milieu de culture cellulaire tumoral défini, supplémenté en glutamine, antibiotiques et antimycotiques. Dans l'ensemble de la cohorte HROC, des lignées cellulaires primaires permanentes de cancer colorectal ont été établies avec succès à partir d'environ 13 % des échantillons testés. L'analyse statistique a identifié un grade tumoral plus élevé comme étant significativement associé à l'établissement réussi de lignées cellulaires primaires, tandis que le statut ganglionnaire avancé a montré une tendance positive. Dans l'analyse multivariée de l'ensemble de la collection, l'atteinte ganglionnaire est apparue comme un facteur prédictif indépendant du succès de l'établissement du modèle.

La collection HROC englobe tous les principaux sous-types moléculaires du carcinome colorectal, y compris les tumeurs présentant une instabilité chromosomique (CIN), un phénotype de méthylation des îlots CpG (CIMP), une stabilité microsatellitaire (MSS) et une instabilité microsatellitaire élevée (MSI-H), ainsi que divers contextes mutationnels affectant des gènes clés tels que KRAS, BRAF, TP53, APC et PIK3CA. Le modèle HROC222 T1 M2 a été généré dans ce cadre rigoureusement caractérisé, ce qui permet son intégration avec des données clinico-pathologiques et moléculaires détaillées et, lorsqu'il est disponible, avec le matériel PDX correspondant. En tant que modèle de carcinome colorectal à faible passage dérivé de patients, le modèle HROC222 T1 M2 est adapté à la recherche en oncologie de précision pour l'étude de la biologie tumorale, des relations génotype-phénotype et les essais thérapeutiques précliniques.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie