HROC222 T1 M2

HROC222 T1 M2 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego utworzona w ramach kolekcji modeli HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) z pierwotnego guza usuniętego u dorosłego pacjenta. Oznaczenie „T1” wskazuje, że próbka została pobrana podczas pierwszej operacji, natomiast „M2” oznacza odpowiedni model in vitro wygenerowany z tego guza. Platforma HROC integruje kompleksowe biobankowanie, znormalizowane adnotacje molekularne oraz równoległe tworzenie przeszczepów pochodzących od pacjentów (PDX) i stałych linii komórkowych o niskiej liczbie pasażów, umożliwiając tworzenie modeli badań translacyjnych z adnotacjami klinicznymi.

Wytworzenie HROC222 T1 M2 odbyło się zgodnie ze znormalizowanymi procedurami obejmującymi mechaniczne rozdzielenie świeżo wyciętej tkanki nowotworowej, przygotowanie zawiesin jednokomórkowych i wysiew na pokryte kolagenem płytki hodowlane w określonym podłożu hodowlanym komórek nowotworowych uzupełnionym glutaminą, antybiotykami i środkami przeciwgrzybiczymi. W całej kohorcie HROC udało się ustanowić stałe pierwotne linie komórkowe raka jelita grubego z około 13% próbek, które poddano badaniu. Analiza statystyczna wykazała, że wyższy stopień złośliwości guza był istotnie związany z pomyślnym ustanowieniem pierwotnej linii komórkowej, podczas gdy zaawansowany stan węzłów chłonnych wykazywał pozytywną tendencję. W analizie wielowymiarowej całej kolekcji zajęcie węzłów chłonnych okazało się niezależnym czynnikiem prognostycznym pomyślnego ustanowienia modelu.

Kolekcja HROC obejmuje wszystkie główne podtypy molekularne raka jelita grubego, w tym nowotwory z niestabilnością chromosomową (CIN), fenotyp metylacji wysp CpG (CIMP), stabilne mikrosatelity (MSS) i wysokie niestabilność mikrosatelitarna (MSI-H), a także różnorodne tło mutacyjne wpływające na kluczowe geny sterujące, takie jak KRAS, BRAF, TP53, APC i PIK3CA. Model HROC222 T1 M2 został wygenerowany w ramach tych rygorystycznie scharakteryzowanych ram, co pozwoliło na integrację ze szczegółowymi danymi kliniczno-patologicznymi i molekularnymi oraz, w miarę dostępności, z odpowiednim materiałem PDX. Jako model raka jelita grubego pochodzący od pacjenta o niskiej liczbie pasażów, HROC222 T1 M2 nadaje się do badań nad biologią nowotworów, relacjami między genotypem a fenotypem oraz przedklinicznych testów terapeutycznych w ramach badań nad precyzyjną onkologią.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym