- Kude
- Transversaalne käärsoolestik
- Haigus
- Adenokartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Ei kohaldata (primaarne ristkoloni kasvaja; T1 M2 tähistab esimest kirurgilist ajapunkti, in vitro mudel 2)
Dokumendid
HROC222 T1 M2
Cell line · Toote number 300859
HROC222 T1 M2 on inimese kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, mis on loodud HROC (Hansestadt Rostocki kolorektaalvähi) mudelikogus proovist...
Kohandamine / Soovitused
- HROC222 T1 M2Cell line€800.00
01Üldine teave
- Kirjeldus
HROC222 T1 M2 on inimese kolorektaalne adenokartsinoomi rakuliin, mis on loodud HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) mudelikogus täiskasvanud patsiendilt eemaldatud primaarse kasvaja põhjal. Tähis „T1” näitab, et proov võeti esimese operatsiooni ajal, „M2” tähistab aga sellest kasvajast loodud vastavat in vitro mudelit. HROC platvorm ühendab endas tervikliku biopanga, standardiseeritud molekulaarse annotatsiooni ning patsiendilt saadud ksenotransplantaatide (PDX) ja püsivate madala passaažiga rakuliinide paralleelse loomise, võimaldades kliiniliselt annotatsioonidega translaatsioonilisi uurimismudeleid.
HROC222 T1 M2 loomine toimus standardiseeritud protseduuri järgi, mis hõlmas värskelt eemaldatud kasvajakoest mehaanilist dissotsiatsiooni, üherakuliste suspensioonide valmistamist ja külvamist kollageeniga kaetud kultuurplaatidele määratletud kasvajarakkude kultuurikeskkonnas, millele oli lisatud glutamiini, antibiootikume ja antimükotikaid. Kogu HROC-kohordi ulatuses loodi püsivad primaarse kolorektaalse vähi rakuliinid edukalt ligikaudu 13% proovitud proovidest. Statistiline analüüs tuvastas, et kõrgem kasvaja klassifikatsioon oli oluliselt seotud edukate primaarse rakuliini loomisega, samas kui kaugelearenenud lümfisõlmede seisund näitas positiivset suundumust. Kogu kogumit hõlmavas mitme muutuja analüüsis ilmnes lümfisõlmede kaasatus kui sõltumatu ennustaja mudeli loomise edukuse kohta.
HROC-kogu hõlmab kõiki peamisi kolorektaalse kartsinoomi molekulaarseid alatüüpe, sealhulgas kromosoomide ebastabiilsust (CIN), CpG-saarte metülatsioonifenotüüpi (CIMP), mikrosatelliitide stabiilsust (MSS) ja mikrosatelliitide kõrget ebastabiilsust (MSI-H) ning mitmesuguseid mutatsioonilisi taustu, mis mõjutavad peamisi draivergeene, nagu KRAS, BRAF, TP53, APC ja PIK3CA. HROC222 T1 M2 loodi selle rangelt iseloomustatud raamistiku piires, mis võimaldab integreerida üksikasjalikke kliinilis-patoloogilisi ja molekulaarseid andmeid ning, kui need on kättesaadavad, vastavat PDX-materjali. Madala passaažiga, patsientidelt saadud kolorektaalse kartsinoomi mudelina sobib HROC222 T1 M2 kasvaja bioloogia, genotüübi-fenotüübi suhete ja prekliiniliste terapeutiliste katsete uurimiseks täppisonkoloogia uuringutes.
- Kude
- Transversaalne käärsoolestik
- Haigus
- Adenokartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Ei kohaldata (primaarne ristkoloni kasvaja; T1 M2 tähistab esimest kirurgilist ajapunkti, in vitro mudel 2)
- Rakendused
- CRC-uuringud; kolorektaalne adenokartsinoom; HROC Linnebacher’i biopank; ravimite tundlikkus; kasvaja bioloogia; PDX-in vitro integratsioon
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-vaba
- GMO-staatuse üksikasjad
- No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Epiteelirakud
04Tunnused
- Viide
- HROC222 T1 M2 (Cytioni katalooginumber 300859)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VQ93
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- Iga 3 kuni 5 päeva tagant
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Doonori vanus
- 79 aastat
- Etniline kuuluvus
- Kaukaasia
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Kehtivad kolmandate osapooltega sõlmitud lepingud
- Jah