HROC222, 1-й семестр, 2-й місяць

HROC222 T1 M2 — це лінія клітин аденокарциноми товстої кишки людини, створена в рамках колекції моделей HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) з первинної пухлини, видаленої у дорослого пацієнта. Позначення «T1» вказує на те, що зразок було отримано під час першої хірургічної операції, а «M2» позначає відповідну in vitro модель, створену на основі цієї пухлини. Платформа HROC об'єднує комплексне біобанкінг, стандартизовану молекулярну анотацію та паралельне створення ксенотрансплантатів, отриманих від пацієнтів (PDX), і постійних клітинних ліній з низьким пасажем, що дозволяє створювати клінічно анотовані трансляційні дослідницькі моделі.

Створення HROC222 T1 M2 відбувалося за стандартизованими процедурами, що включали механічну дисоціацію свіжовидаленої пухлинної тканини, підготовку суспензій з одноклітинних клітин та висівання на покриті колагеном культуральні чашки в спеціальному середовищі для культивування пухлинних клітин, доповненому глутаміном, антибіотиками та антимікотиками. У когорті HROC постійні первинні клітинні лінії колоректального раку були успішно створені з приблизно 13% зразків, що були випробувані. Статистичний аналіз виявив, що вищий ступінь злоякісності пухлини значно пов'язаний з успішним створенням первинної клітинної лінії, тоді як прогресуючий стан лімфатичних вузлів показав позитивну тенденцію. У багатофакторному аналізі всієї колекції ураження лімфатичних вузлів виявилося незалежним предиктором успіху створення моделі.

Колекція HROC охоплює всі основні молекулярні підтипи колоректального раку, включаючи хромосомну нестабільність (CIN), фенотип метилування CpG-островів (CIMP), мікросателітно стабільні (MSS) та мікросателітно нестабільні (MSI-H) пухлини, а також різноманітні мутаційні фони, що впливають на ключові гени-драйвери, такі як KRAS, BRAF, TP53, APC та PIK3CA. HROC222 T1 M2 був створений в рамках цієї суворо охарактеризованої структури, що дозволяє інтегрувати детальні клініко-патологічні та молекулярні дані, а також, за наявності, відповідний матеріал PDX. Як модель колоректального раку з низьким пасажем, отримана від пацієнта, HROC222 T1 M2 підходить для досліджень біології пухлин, взаємозв'язків між генотипом і фенотипом, а також для доклінічних терапевтичних випробувань в рамках досліджень в галузі прецизійної онкології.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>