HROC222 T1 M2

HROC222 T1 M2 est une lignée cellulaire d’adénocarcinome colorectal humain établie dans le cadre de la collection de modèles HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) à partir d’une tumeur primaire réséquée chez un patient adulte. La désignation « T1 » indique que l’échantillon a été prélevé lors de la première intervention chirurgicale, tandis que « M2 » désigne le modèle in vitro correspondant généré à partir de cette tumeur. La plateforme HROC intègre une biobanque exhaustive, une annotation moléculaire normalisée et la création parallèle de xénogreffes dérivées de patients (PDX) et de lignées cellulaires permanentes à faible nombre de passages, permettant ainsi la mise au point de modèles de recherche translationnelle annotés cliniquement.

La génération de HROC222 T1 M2 a suivi des procédures normalisées comprenant la dissociation mécanique du tissu tumoral fraîchement réséqué, la préparation de suspensions de cellules individuelles et l’ensemencement sur des plaques de culture recouvertes de collagène dans un milieu de culture cellulaire tumoral défini, enrichi en glutamine, en antibiotiques et en antimycosiques. Au sein de la cohorte HROC, des lignées cellulaires primaires permanentes de cancer colorectal ont été établies avec succès à partir d’environ 13 % des échantillons étudiés. L’analyse statistique a révélé qu’un grade tumoral plus élevé était significativement associé à la réussite de l’établissement d’une lignée cellulaire primaire, tandis qu’un statut ganglionnaire avancé présentait une tendance positive. Dans l’analyse multivariée portant sur l’ensemble de la collection, l’atteinte ganglionnaire est apparue comme un facteur prédictif indépendant de la réussite de l’établissement du modèle.

La collection HROC englobe tous les principaux sous-types moléculaires du carcinome colorectal, y compris l’instabilité chromosomique (CIN), le phénotype de méthylation des îlots CpG (CIMP), les tumeurs à microsatellites stables (MSS) et à instabilité élevée des microsatellites (MSI-H), ainsi que divers profils mutationnels affectant des gènes moteurs clés tels que KRAS, BRAF, TP53, APC et PIK3CA. La lignée HROC222 T1 M2 a été générée dans ce cadre rigoureusement caractérisé, ce qui permet son intégration à des données clinico-pathologiques et moléculaires détaillées ainsi qu’au matériel PDX correspondant, lorsqu’il est disponible. En tant que modèle de carcinome colorectal dérivé de patient à faible nombre de passages, HROC222 T1 M2 convient à l’étude de la biologie tumorale, des relations génotype-phénotype et des essais thérapeutiques précliniques dans le cadre de la recherche en oncologie de précision.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.