HROC222 T1 M2

HROC222 T1 M2 é uma linhagem celular de adenocarcinoma colorretal humano estabelecida na coleção de modelos HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) a partir de um tumor primário ressecado de um paciente adulto. A designação “T1” indica que a amostra foi obtida no primeiro momento cirúrgico, enquanto “M2” denota o modelo in vitro correspondente gerado a partir desse tumor. A plataforma HROC integra um biobanco abrangente, anotação molecular padronizada e o estabelecimento paralelo de xenoenxertos derivados de pacientes (PDX) e linhagens celulares permanentes de baixa passagem, possibilitando modelos de pesquisa translacional clinicamente anotados.

A geração do HROC222 T1 M2 seguiu procedimentos padronizados envolvendo a dissociação mecânica do tecido tumoral recém-ressecado, a preparação de suspensões de células únicas e a semeadura em placas de cultura revestidas com colágeno, em meio de cultura de células tumorais definido, suplementado com glutamina, antibióticos e antimicóticos. Em toda a coorte HROC, linhagens celulares primárias permanentes de câncer colorretal foram estabelecidas com sucesso a partir de aproximadamente 13% das amostras analisadas. A análise estatística identificou que um grau tumoral mais elevado estava significativamente associado ao estabelecimento bem-sucedido da linhagem celular primária, enquanto o estágio linfonodal avançado apresentou uma tendência positiva. Na análise multivariada da coleção, o envolvimento linfonodal surgiu como um preditor independente do sucesso no estabelecimento do modelo.

A coleção HROC abrange todos os principais subtipos moleculares do carcinoma colorretal, incluindo instabilidade cromossômica (CIN), fenótipo de metilação de ilhas CpG (CIMP), tumores com microssatélites estáveis (MSS) e com alta instabilidade de microssatélites (MSI-H), bem como diversos contextos mutacionais que afetam genes-chave, como KRAS, BRAF, TP53, APC e PIK3CA. O HROC222 T1 M2 foi gerado dentro dessa estrutura rigorosamente caracterizada, permitindo a integração com dados clínico-patológicos e moleculares detalhados e, quando disponível, com o material PDX correspondente. Por ser um modelo de carcinoma colorretal derivado de paciente com poucas passagens, o HROC222 T1 M2 é adequado para investigações sobre a biologia tumoral, relações genótipo-fenótipo e testes terapêuticos pré-clínicos no âmbito da pesquisa em oncologia de precisão.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.