HROC222 T1 M2

HROC222 T1 M2 é uma linha celular de adenocarcinoma colorretal humano estabelecida na coleção de modelos HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) a partir de um tumor primário ressecado de um paciente adulto. A designação «T1» indica que a amostra foi obtida no primeiro momento cirúrgico, enquanto «M2» denota o modelo in vitro correspondente gerado a partir deste tumor. A plataforma HROC integra biobanco abrangente, anotação molecular padronizada e estabelecimento paralelo de xenoenxertos derivados de pacientes (PDX) e linhas celulares permanentes de baixa passagem, permitindo modelos de investigação translacional clinicamente anotados.

A geração do HROC222 T1 M2 seguiu procedimentos padronizados envolvendo a dissociação mecânica do tecido tumoral recém-ressecado, a preparação de suspensões de células únicas e a semeadura em placas de cultura revestidas com colagénio em meio de cultura de células tumorais definido, suplementado com glutamina, antibióticos e antimicóticos. Em toda a coorte HROC, linhas celulares primárias permanentes de cancro colorretal foram estabelecidas com sucesso a partir de aproximadamente 13% das amostras testadas. A análise estatística identificou que a classificação tumoral mais elevada estava significativamente associada ao estabelecimento bem-sucedido da linha celular primária, enquanto o estado nodal avançado mostrou uma tendência positiva. Na análise multivariada em toda a coleção, o envolvimento nodal emergiu como um preditor independente do sucesso do estabelecimento do modelo.

A coleção HROC abrange todos os principais subtipos moleculares de carcinoma colorretal, incluindo instabilidade cromossómica (CIN), fenótipo metilador da ilha CpG (CIMP), tumores estáveis em microssatélites (MSS) e tumores com instabilidade elevada em microssatélites (MSI-H), bem como diversos antecedentes mutacionais que afetam genes impulsionadores importantes, como KRAS, BRAF, TP53, APC e PIK3CA. O HROC222 T1 M2 foi gerado dentro desta estrutura rigorosamente caracterizada, permitindo a integração com dados clínico-patológicos e moleculares detalhados e, quando disponível, material PDX correspondente. Como um modelo de carcinoma colorretal de baixa passagem derivado de pacientes, o HROC222 T1 M2 é adequado para investigações da biologia tumoral, relações genótipo-fenótipo e testes terapêuticos pré-clínicos dentro da pesquisa oncológica de precisão.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia