Skip to content
HROC222 T1 M2
Tissue
Đại tràng ngang
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Metastatic site
Không áp dụng (khối u đại tràng ngang đoạn đầu; T1 M2 chỉ thời điểm phẫu thuật đầu tiên, mô hình in vitro 2)

Documents

HROC222 T1 M2

Cell line · Product number 300859

HROC222 T1 M2 is a human colorectal adenocarcinoma cell line established within the HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) model collection from a pr...

€800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROC222 T1 M2 là dòng tế bào ung thư đại trực tràng ở người được thiết lập trong bộ sưu tập mô hình HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) từ khối u nguyên phát được phẫu thuật cắt bỏ từ bệnh nhân người lớn. Ký hiệu “T1” cho biết mẫu được thu thập tại thời điểm phẫu thuật đầu tiên, trong khi “M2” chỉ mô hình in vitro tương ứng được tạo ra từ khối u này. Nền tảng HROC tích hợp lưu trữ sinh học toàn diện, chú thích phân tử tiêu chuẩn hóa và thiết lập song song các mô hình ghép khối u từ bệnh nhân (PDX) và dòng tế bào vĩnh viễn có số lần truyền thấp, cho phép các mô hình nghiên cứu chuyển giao lâm sàng được chú thích.

Việc tạo ra HROC222 T1 M2 tuân theo các quy trình tiêu chuẩn bao gồm phân tách cơ học mô khối u mới cắt bỏ, chuẩn bị hỗn hợp tế bào đơn lẻ và gieo lên đĩa nuôi cấy phủ collagen trong môi trường nuôi cấy tế bào khối u được bổ sung glutamine, kháng sinh và kháng nấm. Trong nhóm HROC, các dòng tế bào ung thư đại trực tràng nguyên phát vĩnh viễn đã được thiết lập thành công từ khoảng 13% mẫu thử nghiệm. Phân tích thống kê cho thấy độ phân loại khối u cao có liên quan đáng kể đến việc thiết lập thành công dòng tế bào nguyên phát, trong khi tình trạng hạch tiến triển cho thấy xu hướng tích cực. Trong phân tích đa biến trên toàn bộ bộ sưu tập, sự tham gia của hạch đã nổi lên như một yếu tố dự báo độc lập cho thành công của việc thiết lập mô hình.

Bộ sưu tập HROC bao gồm tất cả các loại phân tử chính của ung thư đại trực tràng, bao gồm không ổn định nhiễm sắc thể (CIN), kiểu hình methyl hóa đảo CpG (CIMP), ổn định microsatellite (MSS) và không ổn định microsatellite cao (MSI-H), cũng như các nền tảng đột biến đa dạng ảnh hưởng đến các gen điều khiển chính như KRAS, BRAF, TP53, APC và PIK3CA. HROC222 T1 M2 được tạo ra trong khung khổ được đặc trưng kỹ lưỡng này, cho phép tích hợp với dữ liệu lâm sàng-giải phẫu và phân tử chi tiết, cũng như vật liệu PDX tương ứng (nếu có). Là một mô hình ung thư đại trực tràng được tạo ra từ bệnh nhân với số lần truyền thấp, HROC222 T1 M2 phù hợp cho các nghiên cứu về sinh học khối u, mối quan hệ giữa kiểu gen và kiểu hình, cũng như thử nghiệm điều trị tiền lâm sàng trong nghiên cứu ung thư chính xác.

Tissue
Đại tràng ngang
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Metastatic site
Không áp dụng (khối u đại tràng ngang đoạn đầu; T1 M2 chỉ thời điểm phẫu thuật đầu tiên, mô hình in vitro 2)
Applications
Nghiên cứu CRC; ung thư biểu mô tuyến đại trực tràng; Ngân hàng sinh học HROC Linnebacher; độ nhạy cảm với thuốc; sinh học khối u; tích hợp PDX-in vitro

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô

04Identifiers

Citation
HROC222 T1 M2 (Số catalog Cytion 300859)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
Mỗi 3 đến 5 ngày
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
79 năm
Ethnicity
Người da trắng