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HROC222 T1 M2
Tissue
横结肠
Disease
腺癌
Metastatic site
不适用(原发性横结肠肿瘤;T1 M2表示首次手术时间点,体外模型2)

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HROC222 T1 M2

Cell line · Product number 300859

HROC222 T1 M2 is a human colorectal adenocarcinoma cell line established within the HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) model collection from a pr...

US$800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROC222 T1 M2系人结直肠腺癌细胞系,由汉萨城市罗斯托克结直肠癌(HROC)模型库建立,源自成人患者切除的原发肿瘤。 标记"T1"表示标本取自首次手术时间点,"M2"则代表由此肿瘤建立的对应体外模型。HROC平台整合了全面生物样本库管理、标准化分子注释,以及患者来源异种移植模型(PDX)与永久性低代次细胞系的并行建立,从而构建出具备临床注释的转化研究模型。

HROC222 T1 M2的建立遵循标准化流程:对新鲜切除的肿瘤组织进行机械分离,制备单细胞悬液,并接种于含谷氨酰胺、抗生素及抗真菌剂的定量肿瘤细胞培养基中,置于胶原蛋白包被的培养皿内。 在HROC队列中,约13%的尝试样本成功建立了永久性原代结直肠癌细胞系。统计分析显示,肿瘤分级较高与原代细胞系建立成功显著相关,而晚期淋巴结状态呈现正相关趋势。多变量分析表明,淋巴结转移是模型建立成功的独立预测因子。

HROC样本库涵盖结直肠癌所有主要分子亚型,包括染色体不稳定型(CIN)、CpG岛甲基化表型(CIMP)、微卫星稳定型(MSS)及微卫星不稳定高型(MSI-H)肿瘤,同时包含影响KRAS、 BRAF、TP53、APC及PIK3CA等关键驱动基因的多种突变背景。 HROC222 T1 M2在该严谨表征框架下建立,可整合详细的临床病理学与分子数据,并能匹配对应的患者来源异种移植模型(PDX)材料。作为低传代患者来源的结直肠癌模型,HROC222 T1 M2适用于精准肿瘤学研究中肿瘤生物学机制、基因型-表型关联性及临床前治疗测试的探索。

Tissue
横结肠
Disease
腺癌
Metastatic site
不适用(原发性横结肠肿瘤;T1 M2表示首次手术时间点,体外模型2)
Applications
CRC研究;结直肠腺癌;HROC Linnebacher生物样本库;药物敏感性;肿瘤生物学;PDX与体外实验的整合

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮样
Cell type
上皮细胞

04Identifiers

Citation
HROC222 T1 M2(Cytion 目录号 300859)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Fluid renewal
每 3 至 5 天
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

07Donor

Donor age
79 年
Ethnicity
高加索人