Skip to content
HROC222 T1 M2
Tissue
ลำไส้ใหญ่ส่วนขวาง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งลำไส้ใหญ่ขวางหลัก; T1 M2 หมายถึงจุดเวลาการผ่าตัดครั้งแรก, แบบจำลอง in vitro 2)

Documents

HROC222 T1 M2

Cell line · Product number 300859

HROC222 T1 M2 is a human colorectal adenocarcinoma cell line established within the HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) model collection from a pr...

€800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROC222 T1 M2 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของมนุษย์ ซึ่งถูกสร้างขึ้นภายในคอลเลกชันโมเดล HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) จากเนื้องอกปฐมภูมิที่ผ่าตัดออกจากผู้ใหญ่ การระบุ "T1" หมายถึงตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมในครั้งแรกของการผ่าตัด ขณะที่ "M2" หมายถึงแบบจำลองในหลอดทดลองที่สร้างขึ้นจากเนื้องอกนี้ แพลตฟอร์ม HROC ผสานการเก็บรักษาชีวภาพอย่างครอบคลุม การทำเครื่องหมายโมเลกุลมาตรฐาน และการสร้างแบบขนานของ PDX (patient-derived xenografts) และเซลล์ไลน์ถาวรที่มีการผ่านผ่านต่ำ ซึ่งช่วยให้สามารถสร้างแบบจำลองการวิจัยเชิงแปลที่มีการทำเครื่องหมายทางคลินิกได้

การสร้าง HROC222 T1 M2 ดำเนินการตามขั้นตอนมาตรฐานซึ่งประกอบด้วยการแยกเนื้อเยื่อเนื้องอกที่เพิ่งผ่าตัดออกด้วยวิธีทางกล การเตรียมสารแขวนลอยเซลล์เดี่ยว และการเพาะเลี้ยงบนจานเพาะเลี้ยงที่เคลือบด้วยคอลลาเจนในอาหารเลี้ยงเซลล์เนื้องอกที่กำหนดไว้ โดยเติมกลูตามีน ยาปฏิชีวนะ และยาต้านเชื้อรา ในกลุ่มตัวอย่าง HROC พบว่าสามารถสร้างเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดปฐมภูมิชนิดถาวรได้สำเร็จจากตัวอย่างที่พยายามประมาณร้อยละ 13 การวิเคราะห์ทางสถิติพบว่าการจัดระดับเนื้องอกที่สูงขึ้นมีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับการสร้างเซลล์ไลน์ปฐมภูมิที่ประสบความสำเร็จ ในขณะที่สถานะต่อมน้ำเหลืองที่ลุกลามแสดงแนวโน้มในเชิงบวก ในการวิเคราะห์พหุปัจจัยทั่วทั้งกลุ่มตัวอย่าง การลุกลามไปยังต่อมน้ำเหลืองปรากฏเป็นตัวทำนายอิสระของความสำเร็จในการสร้างแบบจำลอง

คอลเลกชันของ HROC ครอบคลุมชนิดย่อยทางโมเลกุลหลักทั้งหมดของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก รวมถึงชนิดที่มีความไม่เสถียรของโครโมโซม (CIN), ลักษณะเมทิลเลชันของเกาะ CpG (CIMP), ชนิดที่มีไมโครแซทเทลไลท์คงที่ (MSS) และชนิดที่มีความไม่เสถียรของไมโครแซทเทลไลท์สูง (MSI-H) ตลอดจนภูมิหลังของการกลายพันธุ์ที่หลากหลายซึ่งส่งผลกระทบต่อยีนขับเคลื่อนหลัก เช่น KRAS BRAF, TP53, APC และ PIK3CA HROC222 T1 M2 ถูกสร้างขึ้นภายในกรอบที่มีการกำหนดลักษณะอย่างเข้มงวดนี้ ทำให้สามารถรวมข้อมูลทางคลินิกพยาธิวิทยาและข้อมูลโมเลกุลโดยละเอียด และหากมีข้อมูล PDX ที่สอดคล้องกันได้ ในฐานะที่เป็นแบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่ที่ได้จากผู้ป่วยที่มีการผ่านผ่านต่ำ HROC222 T1 M2 เหมาะสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเนื้องอก ความสัมพันธ์ระหว่างจีโนไทป์กับฟีโนไทป์ และการทดสอบการรักษาในระยะก่อนคลินิกในการวิจัยด้านมะเร็งวิทยาที่แม่นยำ

Tissue
ลำไส้ใหญ่ส่วนขวาง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งลำไส้ใหญ่ขวางหลัก; T1 M2 หมายถึงจุดเวลาการผ่าตัดครั้งแรก, แบบจำลอง in vitro 2)
Applications
การวิจัย CRC; มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก; คลังชีวภาพ HROC Linnebacher; ความไวต่อยา; ชีววิทยาของเนื้องอก; การบูรณาการ PDX-in vitro

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
HROC222 T1 M2 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300859)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
ทุก 3 ถึง 5 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
79 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน