HROC222 T1 M2

HROC222 T1 M2 è una linea cellulare di adenocarcinoma colorettale umano creata all'interno della collezione di modelli HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) da un tumore primario asportato da un paziente adulto. La designazione "T1" indica che il campione è stato ottenuto al primo intervento chirurgico, mentre "M2" indica il corrispondente modello in vitro generato da questo tumore. La piattaforma HROC integra una biobanca completa, annotazioni molecolari standardizzate e la creazione parallela di xenotrapianti derivati da pazienti (PDX) e linee cellulari permanenti a basso passaggio, consentendo modelli di ricerca traslazionale con annotazioni cliniche.

La generazione di HROC222 T1 M2 ha seguito procedure standardizzate che prevedevano la dissociazione meccanica del tessuto tumorale appena asportato, la preparazione di sospensioni di cellule singole e la semina su piastre di coltura rivestite di collagene in un terreno di coltura cellulare tumorale definito, integrato con glutammina, antibiotici e antimicotici. In tutta la coorte HROC, le linee cellulari permanenti di cancro colorettale primario sono state stabilite con successo da circa il 13% dei campioni tentati. L'analisi statistica ha identificato un grado tumorale più elevato come significativamente associato al successo nella creazione di linee cellulari primarie, mentre lo stato nodale avanzato ha mostrato una tendenza positiva. Nell'analisi multivariata dell'intera collezione, il coinvolgimento nodale è emerso come un predittore indipendente del successo nella creazione del modello.

La collezione HROC comprende tutti i principali sottotipi molecolari di carcinoma colorettale, tra cui instabilità cromosomica (CIN), fenotipo metilatore dell'isola CpG (CIMP), tumori microsatelliti stabili (MSS) e tumori con instabilità microsatellitare elevata (MSI-H), nonché diversi background mutazionali che influenzano geni chiave come KRAS, BRAF, TP53, APC e PIK3CA. HROC222 T1 M2 è stato generato all'interno di questo quadro rigorosamente caratterizzato, consentendo l'integrazione con dati clinico-patologici e molecolari dettagliati e, ove disponibile, con il corrispondente materiale PDX. Essendo un modello di carcinoma colorettale a basso passaggio derivato da pazienti, HROC222 T1 M2 è adatto per lo studio della biologia tumorale, delle relazioni genotipo-fenotipo e per i test terapeutici preclinici nell'ambito della ricerca oncologica di precisione.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia