Gå direkte til indholdet
HROC222 T1 M2
Væv
Tværgående tyktarm
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Ikke relevant (primær tumor i det tværgående tyktarm; T1 M2 angiver det første kirurgiske tidspunkt, in vitro-model 2)

Dokumenter

HROC222 T1 M2

Cell line · Varenummer 300859

HROC222 T1 M2 er en human kolorektal adenokarcinom-cellelinje, der er etableret inden for HROC-modelsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) ud fra en pr...

€800.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HROC222 T1 M2 er en human kolorektal adenocarcinomcellelinje, der er etableret inden for HROC-modelsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) fra en primær tumor, der er resekteret fra en voksen patient. Betegnelsen "T1" angiver, at prøven blev udtaget ved det første kirurgiske tidspunkt, mens "M2" angiver den tilsvarende in vitro-model, der er genereret ud fra denne tumor. HROC-platformen integrerer omfattende biobanking, standardiseret molekylær annotering og parallel etablering af patientafledte xenotransplantater (PDX) og permanente cellelinjer med lav passage, hvilket muliggør klinisk annoterede translationelle forskningsmodeller.

Generering af HROC222 T1 M2 fulgte standardiserede procedurer, der involverede mekanisk dissociation af frisk resekteret tumorvæv, fremstilling af enkeltcellesuspensioner og udsåning på kollagenbelagte kulturplader i defineret tumorcellekulturmedium tilsat glutamin, antibiotika og antimykotika. På tværs af HROC-kohorten blev permanente primære kolorektale cancercellelinjer med succes etableret fra ca. 13 % af de forsøgte prøver. Statistisk analyse identificerede højere tumorstadier som signifikant forbundet med succesfuld etablering af primære cellelinjer, mens avanceret nodalstatus viste en positiv tendens. I multivariat analyse på tværs af samlingen fremstod nodal involvering som en uafhængig prædiktor for succesfuld modeletablering.

HROC-samlingen omfatter alle vigtige molekylære subtyper af kolorektal karcinom, herunder kromosomale ustabilitet (CIN), CpG-ø-methyleringsfænotype (CIMP), mikrosatellitstabil (MSS) og mikrosatellitustabilitet-høj (MSI-H) tumorer, samt forskellige mutationsbaggrunde, der påvirker vigtige drivergener såsom KRAS, BRAF, TP53, APC og PIK3CA. HROC222 T1 M2 blev genereret inden for denne strengt karakteriserede ramme, hvilket muliggør integration med detaljerede klinisk-patologiske og molekylære data og, hvor det er tilgængeligt, tilsvarende PDX-materiale. Som en lavpassage, patientafledt kolorektal karcinomodel er HROC222 T1 M2 velegnet til undersøgelser af tumorbiologi, genotype-fenotype-relationer og prækliniske terapeutiske test inden for præcisionsonkologisk forskning.

Væv
Tværgående tyktarm
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Ikke relevant (primær tumor i det tværgående tyktarm; T1 M2 angiver det første kirurgiske tidspunkt, in vitro-model 2)
Anvendelser
CRC-forskning; kolorektalt adenokarcinom; HROC Linnebacher-biobanken; lægemiddelfølsomhed; tumorbiologi; integration af PDX og in vitro-forsøg

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HROC222 T1 M2 (Cytion katalognummer 300859)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
79 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk