- Væv
- Tværgående tyktarm
- Sygdom
- Adenokarcinom
- Metastasested
- Ikke relevant (primær tumor i det tværgående tyktarm; T1 M2 angiver det første kirurgiske tidspunkt, in vitro-model 2)
Dokumenter
HROC222 T1 M2
Cell line · Varenummer 300859
HROC222 T1 M2 er en human kolorektal adenokarcinom-cellelinje, der er etableret inden for HROC-modelsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) ud fra en pr...
Tilpasning / Anbefalinger
- HROC222 T1 M2Cell line€800.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
HROC222 T1 M2 er en human kolorektal adenocarcinomcellelinje, der er etableret inden for HROC-modelsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) fra en primær tumor, der er resekteret fra en voksen patient. Betegnelsen "T1" angiver, at prøven blev udtaget ved det første kirurgiske tidspunkt, mens "M2" angiver den tilsvarende in vitro-model, der er genereret ud fra denne tumor. HROC-platformen integrerer omfattende biobanking, standardiseret molekylær annotering og parallel etablering af patientafledte xenotransplantater (PDX) og permanente cellelinjer med lav passage, hvilket muliggør klinisk annoterede translationelle forskningsmodeller.
Generering af HROC222 T1 M2 fulgte standardiserede procedurer, der involverede mekanisk dissociation af frisk resekteret tumorvæv, fremstilling af enkeltcellesuspensioner og udsåning på kollagenbelagte kulturplader i defineret tumorcellekulturmedium tilsat glutamin, antibiotika og antimykotika. På tværs af HROC-kohorten blev permanente primære kolorektale cancercellelinjer med succes etableret fra ca. 13 % af de forsøgte prøver. Statistisk analyse identificerede højere tumorstadier som signifikant forbundet med succesfuld etablering af primære cellelinjer, mens avanceret nodalstatus viste en positiv tendens. I multivariat analyse på tværs af samlingen fremstod nodal involvering som en uafhængig prædiktor for succesfuld modeletablering.
HROC-samlingen omfatter alle vigtige molekylære subtyper af kolorektal karcinom, herunder kromosomale ustabilitet (CIN), CpG-ø-methyleringsfænotype (CIMP), mikrosatellitstabil (MSS) og mikrosatellitustabilitet-høj (MSI-H) tumorer, samt forskellige mutationsbaggrunde, der påvirker vigtige drivergener såsom KRAS, BRAF, TP53, APC og PIK3CA. HROC222 T1 M2 blev genereret inden for denne strengt karakteriserede ramme, hvilket muliggør integration med detaljerede klinisk-patologiske og molekylære data og, hvor det er tilgængeligt, tilsvarende PDX-materiale. Som en lavpassage, patientafledt kolorektal karcinomodel er HROC222 T1 M2 velegnet til undersøgelser af tumorbiologi, genotype-fenotype-relationer og prækliniske terapeutiske test inden for præcisionsonkologisk forskning.
- Væv
- Tværgående tyktarm
- Sygdom
- Adenokarcinom
- Metastasested
- Ikke relevant (primær tumor i det tværgående tyktarm; T1 M2 angiver det første kirurgiske tidspunkt, in vitro-model 2)
- Anvendelser
- CRC-forskning; kolorektalt adenokarcinom; HROC Linnebacher-biobanken; lægemiddelfølsomhed; tumorbiologi; integration af PDX og in vitro-forsøg
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Mand
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-fri
- Oplysninger om GMO-status
- No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitheliale celler
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HROC222 T1 M2 (Cytion katalognummer 300859)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VQ93
05Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Væskeudskiftning
- Hver 3. til 5. dag
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
07Donor
- Donorens alder
- 79 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Kaukasisk
08Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der gælder aftaler med tredjeparter
- Ja